MKN1

Η MKN1 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του στομάχου που προέρχεται από έναν ενήλικα ασθενή με αδενόκαρκωμα χαμηλού βαθμού διαφοροποίησης. Η κυτταρική αυτή σειρά χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο, λόγω της σημασίας της στη μοντελοποίηση της εξέλιξης του καρκίνου του στομάχου, της διήθησής του και της ανταπόκρισής του στις θεραπείες. Παρουσιάζει μεσεγχυματική μορφολογία, η οποία υποδηλώνει επιθηλιο-μεσεγχυματική μετάπτωση (EMT), μια διαδικασία κρίσιμη για τη μετάσταση του καρκίνου. Η κυτταρική σειρά MKN1 διακρίνεται για τη μέτρια έως χαμηλή έκφραση βασικών πρωτεϊνών όπως η RhoA, γεγονός που την καθιστά απαραίτητο εργαλείο στη μελέτη των οδών σηματοδότησης που συνδέονται με την κυτταρική προσκόλληση και κινητικότητα.

Πρόσφατες έρευνες υπογραμμίζουν τη σημασία της σειράς MKN1 στη διερεύνηση του ρόλου της DCLK1 (κινάση τύπου Doublecortin 1), ενός υποθετικού δείκτη καρκινικών βλαστικών κυττάρων, στον καρκίνο του στομάχου. Η υπερέκφραση της DCLK1 στα κύτταρα MKN1 προάγει την EMT και ενισχύει την έκκριση μικρών εξωκυτταρικών κυστιδίων (sEVs), τα οποία εμπλέκονται στη μετακίνηση των κυττάρων και στην αναδιαμόρφωση του μικροπεριβάλλοντος του όγκου. Η πρωτεομική ανάλυση των sEVs από κύτταρα MKN1 που υπερεκφράζουν το DCLK1 έχει εντοπίσει σημαντικές μεταβολές σε πρωτεΐνες που εμπλέκονται στη μετανάστευση και την προσκόλληση, όπως η STRAP και η BCAM. Επιπλέον, η κινάση δραστηριότητα του DCLK1 φαίνεται να ρυθμίζει την επιλογή των πρωτεϊνών-φορτίου εντός αυτών των κυστιδίων, υπογραμμίζοντας το δυναμικό του ως θεραπευτικού στόχου.

Επιπλέον, μελέτες σχετικά με τη μετάλλαξη RHOA (R129W) σε κύτταρα MKN1 έχουν αποκαλύψει τον ρόλο της στην αλλοίωση των οδών κυτταρικής μετανάστευσης και προσκόλλησης, ανεξάρτητα από τις μεταλλάξεις του CDH1. Λειτουργικές αναλύσεις δείχνουν ότι η μετάλλαξη οδηγεί σε υψηλότερη ενεργή κατάσταση του RhoA δεσμευμένου με GTP, συνδέοντάς την με αυξημένη κυτταρική κινητικότητα. Αυτά τα ευρήματα καθιστούν το MKN1 ένα ισχυρό μοντέλο για την ανάλυση των γενετικών και μοριακών μηχανισμών που υποκρύπτονται στην παθογένεση του καρκίνου του στομάχου και για τη δοκιμή πιθανών θεραπευτικών παρεμβάσεων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης