MKN1

MKN1 on ihmisen mahasyöpäsolulinja, joka on peräisin aikuispotilaalta, jolla oli huonosti erilaistunut adenokarsinooma. Tätä solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuksessa, koska se soveltuu hyvin mahasyövän etenemisen, invaasion ja hoitovasteen mallintamiseen. Sillä on mesenkyymimäinen morfologia, mikä viittaa epiteeli-mesenkyymisiirtymään (EMT), joka on syövän etäpesäkkeiden muodostumisen kannalta kriittinen prosessi. MKN1-solulinja erottuu siitä, että siinä keskeisten proteiinien, kuten RhoA:n, ilmentyminen on kohtalaista tai vähäistä, mikä tekee siitä välttämättömän työkalun solujen adheesioon ja liikkuvuuteen liittyvien signalointireittien tutkimuksessa.

Tuoreet tutkimukset korostavat MKN1:n merkitystä tutkittaessa DCLK1:n (Doublecortin-like kinase 1) roolia mahasyövässä; DCLK1 on oletettu syöpäsolujen merkkiaine. DCLK1:n yli-ilmentyminen MKN1-soluissa edistää EMT:tä ja tehostaa pienten solunulkoisten vesikkelien (sEV) eritystä, jotka liittyvät solujen migraatioon ja kasvaimen mikroympäristön uudelleenmuodostumiseen. DCLK1:tä yli-ilmentävistä MKN1-soluista peräisin olevien sEV:ien proteomianalyysissä on havaittu merkittäviä muutoksia siirtymiseen ja adheesioon osallistuvissa proteiineissa, kuten STRAP:ssa ja BCAM:ssa. Lisäksi DCLK1:n kinaasiaktiivisuus näyttää säätelevän näiden vesikkelien sisältämien proteiinien valintaa, mikä korostaa sen potentiaalia terapeuttisena kohteena.

Lisäksi MKN1-soluissa tehdyt RHOA-mutaatiota (R129W) koskevat tutkimukset ovat paljastaneet sen roolin solujen liikkumisen ja adheesioradojen muuttamisessa, riippumatta CDH1-mutaatioista. Toiminnalliset kokeet osoittavat, että mutaatio johtaa RhoA:n korkeampaan aktiiviseen GTP-sitoutuneeseen tilaan, mikä liittää sen solujen liikkuvuuden lisääntymiseen. Nämä havainnot asettavat MKN1:n vankaksi malliksi mahasyövän patogeneesin taustalla olevien geneettisten ja molekyylimekanismien selvittämiseen sekä potentiaalisten terapeuttisten interventioiden testaamiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa