MKN1
Cell line · Product number 305589
MKN1 is a human gastric cancer cell line derived from an adult patient with poorly differentiated adenocarcinoma. This cell line is widely used in cancer ...
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01General information
- Description
MKN1 是一種源自一名患有低分化腺癌之成人患者的人類胃癌細胞系。由於該細胞系在模擬胃癌的進展、侵襲性及對治療的反應方面具有重要意義,因此在癌症研究中被廣泛應用。 該細胞系呈現間質樣形態,顯示出上皮-間質轉化(EMT)的特徵,而此過程在癌症轉移中至關重要。MKN1 細胞系因其對 RhoA 等關鍵蛋白質的表達水平處於中低水平而備受矚目,使其成為研究與細胞黏附及運動性相關訊號傳導路徑的重要工具。
近期研究強調了 MKN1 在探索 DCLK1(Doublecortin-like kinase 1,一種假定的癌症幹細胞標記物)於胃癌中所扮演角色的重要性。 MKN1 細胞中 DCLK1 的過度表達會促進上皮-間質轉化,並增強小細胞外囊泡(sEVs)的分泌,而這些囊泡與細胞遷移及腫瘤微環境重塑有關。 對 DCLK1 過度表達的 MKN1 細胞所釋放的小型細胞外囊泡(sEVs)進行的蛋白質體學分析,已鑑定出參與遷移與黏附的蛋白質(如 STRAP 和 BCAM)出現顯著改變。此外,DCLK1 的激酶活性似乎會調節這些囊泡內載體蛋白的選擇,凸顯其作為治療標靶的潛力。
此外,針對 MKN1 細胞中 RHOA 突變(R129W)的研究揭示,該突變在改變細胞遷移與黏附路徑方面發揮作用,且此作用獨立於 CDH1 突變。 功能性檢測顯示,該突變會導致 RhoA 處於更高活性的 GTP 結合狀態,進而與細胞運動性增強相關。這些發現使 MKN1 成為解析胃癌病理機制背後遺傳與分子機制,以及測試潛在治療干預措施的可靠模型。
- Tissue
- 胃
- Disease
- 腺鱗狀細胞癌
- Metastatic site
- 淋巴結
- Synonyms
- MKN-1
- MKN 1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
04Identifiers
- Citation
- MKN1(Cytion 型號 305589)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1415
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- 突變:TP53,p.Val143Ala (c.428T>C)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶需使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則需使用5-10毫升。 接著,用 TrypLE Express 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫落。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 72年
- Ethnicity
- 日文
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
