U251 MG/TMZ

U251 MG/TMZ es un derivado resistente a la temozolomida de la línea celular de glioblastoma humano U251 MG. La línea parental U251 MG se estableció a partir del glioma maligno de un paciente adulto y se utiliza ampliamente como modelo de tumores astrocíticos de alto grado. Las células U251 MG/TMZ se generan mediante la exposición gradual y a largo plazo de las células U251 MG originales a concentraciones crecientes de temozolomida (TMZ), el agente quimioterapéutico alquilante estándar utilizado en el tratamiento del glioblastoma. Este proceso de selección da como resultado un fenotipo estable caracterizado por una sensibilidad significativamente reducida a la citotoxicidad inducida por la TMZ en comparación con la línea parental.

Desde el punto de vista mecánico, la resistencia a la TMZ en las células U251 MG/TMZ se asocia comúnmente con la regulación al alza de la O6-metilguanina-ADN metiltransferasa (MGMT), una mayor capacidad de reparación del daño al ADN, alteraciones en las vías de reparación de desajustes y la activación de cascadas de señalización que favorecen la supervivencia. Las células resistentes suelen presentar una apoptosis reducida tras la exposición al TMZ, con una disminución de la activación de las caspasas y una participación atenuada de la vía mitocondrial. Otras adaptaciones moleculares pueden incluir la desregulación de las vías de señalización PI3K/AKT, MAPK, NF-κB o STAT3, así como la expresión alterada de transportadores de fármacos y marcadores asociados a la capacidad de diferenciación en células madre, dependiendo del protocolo de selección utilizado.

Las células U251 MG/TMZ mantienen un crecimiento adherente con una morfología astrocítica similar a la de la línea parental, pero muestran valores de IC50 de TMZ más altos y una proliferación sostenida bajo la presión del fármaco. Este modelo se utiliza ampliamente para investigar los mecanismos de la quimiorresistencia adquirida, identificar biomarcadores predictivos de la respuesta terapéutica y evaluar nuevas estrategias combinatorias destinadas a superar la resistencia al TMZ. Como tal, U251 MG/TMZ proporciona una plataforma in vitro clínicamente relevante para estudiar el fracaso del tratamiento y la vulnerabilidad terapéutica en el glioblastoma.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.