Pereiti prie turinio
U251 MG/TMZ
Audinys
Smegenys
Liga
Astrocitoma
Metastazių vieta
Pirminio naviko lokalizacija (smegenys)
Sinonimai
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumentai

U251 MG/TMZ

Cell line · Prekės numeris 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

U251 MG/TMZ yra temozolomidui atsparus žmogaus glioblastomos ląstelių linijos U251 MG darinys. Pirminė U251 MG linija buvo sukurta iš suaugusio paciento piktybinės gliomos ir yra plačiai naudojama kaip aukšto laipsnio astrocitozinių navikų modelis. U251 MG/TMZ ląstelės yra sukurtos laipsniškai, ilgą laiką veikiant pirmines U251 MG ląsteles didėjančiomis temozolomido (TMZ) koncentracijomis, kuris yra standartinis alkiluojantis chemoterapinis vaistas, naudojamas glioblastomos gydymui. Šis atrankos procesas sukuria stabilų fenotipą, kuris pasižymi žymiai sumažėjusiu jautrumu TMZ sukeltam citotoksiškumui, palyginti su pirminiu ląstelių linijos fenotipu.

Mechanizmo požiūriu, TMZ atsparumas U251 MG/TMZ ląstelėse paprastai siejamas su O6-metilguanino-DNR metiltransferazės (MGMT) reguliacijos padidėjimu, padidėjusiu DNR pažeidimų taisymo pajėgumu, nesutapimų taisymo kelių pokyčiais ir išgyvenimo signalų kaskadų aktyvacija. Atsparios ląstelės dažnai rodo sumažėjusį apoptozę po TMZ poveikio, sumažėjusį kaspazės aktyvumą ir susilpnėjusį mitochondrijų kelio įsitraukimą. Papildomi molekuliniai prisitaikymai gali apimti PI3K/AKT, MAPK, NF-κB arba STAT3 signalinių kelių disreguliaciją, taip pat pakeistą vaistų transporterių ir su kamieninėmis savybėmis susijusių žymenų ekspresiją, priklausomai nuo naudojamo atrankos protokolo.

U251 MG/TMZ ląstelės išlaiko adhezyvinį augimą su astrocitu morfologija, panašia į tėvinę liniją, bet rodo aukštesnes TMZ IC50 vertes ir ilgalaikį proliferaciją vaisto spaudimo sąlygomis. Šis modelis plačiai naudojamas tirti įgyto chemoresistentiškumo mechanizmus, identifikuoti terapinio atsako prognozės biomarkerius ir vertinti naujas kombinuotąsias strategijas, skirtas TMZ atsparumui įveikti. Taigi, U251 MG/TMZ suteikia klinikinę reikšmę turinčią in vitro platformą glioblastomos gydymo nesėkmių ir terapinio pažeidžiamumo tyrimams.

Audinys
Smegenys
Liga
Astrocitoma
Metastazių vieta
Pirminio naviko lokalizacija (smegenys)
Paraiškos
Glioblastomos atsparumo TMZ tyrimai; įgyto atsparumo chemoterapijai mechanizmai; MGMT perprodukcija; DNR nesutapimų taisymo kelias; PI3K/AKT/MAPK/NF-κB išgyvenimą skatinantis signalizacijos kelias; vaistų, padedančių įveikti atsparumą TMZ, vertinimas; GBM recidyvų modeliavimas; atsparumo biomarkerių atradimas
Sinonimai
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Glijos ląstelės (astrocitai)
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug 36–48 valandos (TMZ atsparios sublinijos dažnai dauginasi lėčiau nei pirminės)

04Identifikatoriai

Nuoroda
U251 MG/TMZ (Cytion katalogo numeris 305884)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Atsparus TMZ

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 50 µM temozolomidu (TMZ).
Disociacijos reagentas
Accutase
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
75 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių