U251 MG/TMZ

U251 MG/TMZは、ヒト膠芽腫細胞株U251 MGのテモゾロミド耐性誘導株である。親株であるU251 MG株は成人患者の悪性膠芽腫から樹立され、高悪性度星細胞腫瘍のモデルとして広く用いられている。 U251 MG/TMZ細胞は、親株であるU251 MG細胞を、膠芽腫治療に用いられる標準的なアルキル化化学療法剤であるテモゾロミド（TMZ）の濃度を段階的に増加させながら長期にわたり曝露することで生成される。この選択過程により、親株と比較してTMZ誘導性細胞毒性に対する感受性が著しく低下した安定的な表現型が得られる。

機序的には、U251 MG/TMZ細胞におけるTMZ耐性は、O6-メチルグアニン-DNAメチルトランスフェラーゼ（MGMT）の発現亢進、DNA損傷修復能の増強、ミスマッチ修復経路の変化、および生存促進シグナルカスケードの活性化と関連している。 耐性細胞は、TMZ曝露後のアポトーシス減少を頻繁に示し、カスパーゼ活性化が低下し、ミトコンドリア経路の関与が弱まる。追加の分子適応には、PI3K/AKT、MAPK、NF-κB、またはSTAT3シグナル伝達経路の調節異常、ならびに使用される選択プロトコルに依存する薬剤輸送体および幹細胞性関連マーカーの発現変化が含まれる可能性がある。

U251 MG/TMZ細胞は親株と同様の星状細胞様形態で接着性増殖を維持するが、より高いTMZ IC50値を示し、薬剤負荷下でも持続的な増殖能を有する。 本モデルは、獲得化学療法耐性のメカニズム解明、治療反応を予測するバイオマーカーの同定、TMZ耐性を克服する新規併用戦略の評価に広く活用されている。したがってU251 MG/TMZは、膠芽腫における治療失敗と治療感受性の研究に臨床的に関連性の高いin vitroプラットフォームを提供する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。