Mine otse sisu juurde
U251 MG/TMZ
Kude
Aju
Haigus
Astrotsütoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (aju)
Sünonüümid
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumendid

U251 MG/TMZ

Cell line · Toote number 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

U251 MG/TMZ on temozolomidiresistentne derivaat inimese glioblastoomi rakuliinist U251 MG. Vanem U251 MG liin loodi täiskasvanud patsiendi pahaloomulisest glioomist ja seda kasutatakse laialdaselt kõrge astme astrotsütaarsete kasvajate mudelina. U251 MG/TMZ rakud tekitatakse emaraku U251 MG rakkude järkjärgulise, pikaajalise kokkupuute kaudu temozolomidi (TMZ) kasvava kontsentratsiooniga, mis on glioblastoomi ravis kasutatav standardne alküüliv kemoteraapiaaine. Selle valikuprotsessi tulemuseks on stabiilne fenotüüp, mida iseloomustab emarakuga võrreldes oluliselt vähenenud tundlikkus TMZ-i poolt indutseeritud tsütotoksilisuse suhtes.

Mehhanistiliselt on TMZ-resistentsus U251 MG/TMZ rakkudes tavaliselt seotud O6-metüülguanin-DNA metüültransferaasi (MGMT) ülesreguleerimise, DNA kahjustuste parandamise võime suurenemise, mittesobivate paaride parandamise radade muutuste ja ellujäämist soodustavate signaalikaskadide aktiveerimisega. Resistentsed rakud näitavad sageli TMZ-ga kokkupuutumise järel vähendatud apoptoosi, kaspaasi aktiivsuse vähenemist ja mitokondriaalse rada kaasatuse nõrgenemist. Lisaks võivad molekulaarsed kohanemised hõlmata PI3K/AKT, MAPK, NF-κB või STAT3 signaaliteede düsregulatsiooni, samuti ravimite transportijate ja tüvirakkudega seotud markerite muutunud ekspressiooni, sõltuvalt kasutatud valikuprotokollist.

U251 MG/TMZ rakud säilitavad adhesiivse kasvu astrotsüütide morfoloogiaga, mis on sarnane emaliiniga, kuid näitavad kõrgemad TMZ IC50 väärtused ja püsiva proliferatsiooni ravimi surve all. Seda mudelit kasutatakse laialdaselt omandatud kemoresistentsuse mehhanismide uurimiseks, ravivastuse prognoosimise biomarkereid identifitseerimiseks ja TMZ-resistentsuse ületamiseks suunatud uute kombinatsioonistrateegiate hindamiseks. Seega pakub U251 MG/TMZ kliiniliselt asjakohast in vitro platvormi glioblastoomi ravi ebaõnnestumise ja ravivastuse uurimiseks.

Kude
Aju
Haigus
Astrotsütoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (aju)
Rakendused
Glioblastoomi TMZ-resistentsuse uurimine; omandatud kemoresistentsuse mehhanismid; MGMT-i üliekspressioon; DNA-mismatch-parandusrada; PI3K/AKT/MAPK/NF-κB ellujäämist soodustav signaalitee; TMZ-resistentsust ületavate ravimite hindamine; GBM-i retsidiivi modelleerimine; resistentsuse biomarkerite avastamine
Sünonüümid
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Glia rakud (astrotsüüdid)
Kahekordistumisaeg
u. 36–48 tundi (TMZ-resistentsed alaliinid paljunevad sageli aeglasemalt kui emaliin)

04Tunnused

Viide
U251 MG/TMZ (Cytioni katalooginumber 305884)
NCBI maksukood
9606

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
TMZ-resistentsus

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 10% FBS-iga ja 50 µM temozolomidiga (TMZ).
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
75 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia