Prejsť na obsah
U251 MG/TMZ
Tkanivo
Mozog
Choroba
Astrocytóm
Miesto metastáz
Miesto primárneho nádoru (mozog)
Synonymá
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumenty

U251 MG/TMZ

Cell line · Číslo výrobku 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

U251 MG/TMZ je derivátom ľudského glioblastómového bunky U251 MG, ktorý je rezistentný voči temozolomidu. Rodičovská línia U251 MG bola vytvorená z malígneho gliómu dospelého pacienta a je široko používaná ako model vysoko stupňových astrocytových nádorov. Bunky U251 MG/TMZ sa vytvárajú postupným, dlhodobým vystavením rodičovských buniek U251 MG rastúcim koncentráciám temozolomidu (TMZ), štandardného alkylujúceho chemoterapeutického činidla používaného pri liečbe glioblastómu. Výsledkom tohto selekčného procesu je stabilný fenotyp charakterizovaný výrazne zníženou citlivosťou na cytotoxicitu indukovanú TMZ v porovnaní s rodičovskou líniou.

Z mechanického hľadiska je rezistencia voči TMZ v bunkách U251 MG/TMZ bežne spojená s upreguláciou O6-metylguanín-DNA metyltransferázy (MGMT), zvýšenou schopnosťou opravy poškodenia DNA, zmenami v opravných dráhach nesprávneho párovania a aktiváciou signálnych kaskád podporujúcich prežitie. Rezistentné bunky často vykazujú zníženú apoptózu po expozícii TMZ, so zníženou aktiváciou kaspázy a oslabeným zapojením mitochondriálnej dráhy. Ďalšie molekulárne adaptácie môžu zahŕňať dysreguláciu signálnych dráh PI3K/AKT, MAPK, NF-κB alebo STAT3, ako aj zmenenú expresiu transportérov liekov a markerov spojených so kmeňovými bunkami, v závislosti od použitého selekčného protokolu.

Bunky U251 MG/TMZ si zachovávajú adhezívny rast s astrocytovou morfológiou podobnou rodičovskej línii, ale vykazujú vyššie hodnoty TMZ IC50 a trvalú proliferáciu pod tlakom lieku. Tento model sa široko používa na skúmanie mechanizmov získanej chemorezistencie, identifikáciu biomarkerov predikujúcich terapeutickú odpoveď a hodnotenie nových kombinovaných stratégií zameraných na prekonanie rezistencie voči TMZ. Ako taký, U251 MG/TMZ poskytuje klinicky relevantnú in vitro platformu na štúdium zlyhania liečby a terapeutickej zraniteľnosti pri glioblastóme.

Tkanivo
Mozog
Choroba
Astrocytóm
Miesto metastáz
Miesto primárneho nádoru (mozog)
Aplikácie
Výskum rezistencie glioblastómu voči TMZ; mechanizmy získanej chemorezistencie; nadmerná expresia génu MGMT; dráha opravy nesúladu DNA; pro-prežívacia signálna dráha PI3K/AKT/MAPK/NF-κB; hodnotenie liečiv prekonávajúcich rezistenciu voči TMZ; modelovanie recidívy GBM; objav biomarkerov rezistencie
Synonymá
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Gliové bunky (astrocytové)
Doba zdvojnásobenia
približne 36 až 48 hodín (sublínie rezistentné voči TMZ sa často množia pomalšie ako rodičovské)

04Identifikátory

Citácia
U251 MG/TMZ (číslo katalógu Cytion 305884)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Odolný voči TMZ

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium 10 % FBS a 50 µM temozolomidom (TMZ).
Disociačné činidlo
Accutase
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
75 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský