Přejít na obsah
U251 MG/TMZ
Tkáň
Mozek
Nemoc
Astrocytom
Místo metastázy
Místo primárního nádoru (mozek)
Synonyma
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumenty

U251 MG/TMZ

Cell line · Číslo výrobku 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

U251 MG/TMZ je derivát lidské glioblastomové buněčné linie U251 MG rezistentní na temozolomid. Rodná linie U251 MG byla vytvořena z maligního gliomu dospělého pacienta a je široce používána jako model vysoce maligních astrocytárních nádorů. Buňky U251 MG/TMZ jsou generovány postupným, dlouhodobým vystavením mateřských buněk U251 MG rostoucím koncentracím temozolomidu (TMZ), standardního alkylujícího chemoterapeutického činidla používaného při léčbě glioblastomu. Tento selekční proces vede ke stabilnímu fenotypu charakterizovanému významně sníženou citlivostí na cytotoxicitu indukovanou TMZ ve srovnání s mateřskou linií.

Mechanisticky je rezistence na TMZ v buňkách U251 MG/TMZ běžně spojována s upregulací O6-methylguanin-DNA metyltransferázy (MGMT), zvýšenou schopností opravy poškození DNA, změnami v opravných drahách nesouladu a aktivací signálních kaskád podporujících přežití. Rezistentní buňky často vykazují sníženou apoptózu po expozici TMZ, se sníženou aktivací kaspázy a oslabeným zapojením mitochondriální dráhy. Další molekulární adaptace mohou zahrnovat dysregulaci signálních drah PI3K/AKT, MAPK, NF-κB nebo STAT3, jakož i změněnou expresi transportérů léčiv a markerů spojených se stemness, v závislosti na použitém selekčním protokolu.

Buňky U251 MG/TMZ si zachovávají adhezivní růst s astrocytární morfologií podobnou mateřské linii, ale vykazují vyšší hodnoty TMZ IC50 a trvalou proliferaci pod tlakem léku. Tento model je široce používán k výzkumu mechanismů získané chemoresistence, identifikaci biomarkerů předpovídajících terapeutickou odpověď a hodnocení nových kombinovaných strategií zaměřených na překonání rezistence na TMZ. Jako takový poskytuje U251 MG/TMZ klinicky relevantní in vitro platformu pro studium selhání léčby a terapeutické zranitelnosti u glioblastomu.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Astrocytom
Místo metastázy
Místo primárního nádoru (mozek)
Aplikace
Výzkum rezistence glioblastomu na TMZ; mechanismy získané chemorezistence; nadměrná exprese genu MGMT; dráha opravy neshod DNA; signální dráha PI3K/AKT/MAPK/NF-κB podporující přežití; hodnocení látek překonávajících rezistenci na TMZ; modelování recidivy GBM; objev biomarkerů rezistence
Synonyma
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Gliové buňky (astrocytární)
Doba zdvojnásobení
přibližně 36 až 48 hodin (sublinie rezistentní na TMZ se často množí pomaleji než mateřská linie)

04Identifikátory

Citace
U251 MG/TMZ (katalogové číslo Cytion 305884)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Odolný vůči TMZ

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10 % FBS a 50 µM temozolomidem (TMZ).
Disociační činidlo
Accutase
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
75 let
Etnická příslušnost
Kavkazský