U251 MG/TMZ

U251 MG/TMZ é um derivado resistente à temozolomida da linha celular de glioblastoma humano U251 MG. A linha parental U251 MG foi estabelecida a partir do glioma maligno de um paciente adulto e é amplamente utilizada como modelo de tumores astrocíticos de alto grau. As células U251 MG/TMZ são geradas através da exposição gradual e prolongada das células parentais U251 MG a concentrações crescentes de temozolomida (TMZ), o agente quimioterapêutico alquilante padrão utilizado no tratamento do glioblastoma. Este processo de seleção resulta num fenótipo estável caracterizado por uma sensibilidade significativamente reduzida à citotoxicidade induzida pela TMZ em comparação com a linha parental.

Mecanicamente, a resistência à TMZ nas células U251 MG/TMZ está comumente associada à regulação positiva da O6-metilguanina-DNA metiltransferase (MGMT), maior capacidade de reparo de danos ao DNA, alterações nas vias de reparo de incompatibilidade e ativação de cascatas de sinalização pró-sobrevivência. As células resistentes frequentemente exibem apoptose reduzida após a exposição ao TMZ, com diminuição da ativação da caspase e atenuação do envolvimento da via mitocondrial. Adaptações moleculares adicionais podem incluir desregulação das vias de sinalização PI3K/AKT, MAPK, NF-κB ou STAT3, bem como expressão alterada de transportadores de fármacos e marcadores associados à stemness, dependendo do protocolo de seleção utilizado.

As células U251 MG/TMZ mantêm o crescimento aderente com morfologia astrocítica semelhante à linha parental, mas demonstram valores mais elevados de IC50 de TMZ e proliferação sustentada sob pressão do fármaco. Este modelo é amplamente utilizado para investigar mecanismos de quimiorresistência adquirida, identificar biomarcadores preditivos de resposta terapêutica e avaliar novas estratégias combinatórias destinadas a superar a resistência ao TMZ. Como tal, o U251 MG/TMZ fornece uma plataforma in vitro clinicamente relevante para estudar a falha do tratamento e a vulnerabilidade terapêutica no glioblastoma.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia