
- Weefsel
- Hersenen
- Ziekte
- Astrocytoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Locatie van de primaire tumor (hersenen)
- Synoniemen
- U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG
Documenten
U251 MG/TMZ
Cell line · Productnummer 305884
U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...
Maatwerk / Aanbevelingen
- U251 MG/TMZCell line€1,200.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
U251 MG/TMZ is een temozolomide-resistent derivaat van de menselijke glioblastoomcellijn U251 MG. De oorspronkelijke U251 MG-lijn is afkomstig van het kwaadaardige glioom van een volwassen patiënt en wordt veel gebruikt als model voor hooggradige astrocytaire tumoren. U251 MG/TMZ-cellen worden gegenereerd door stapsgewijze, langdurige blootstelling van de oorspronkelijke U251 MG-cellen aan toenemende concentraties temozolomide (TMZ), het standaard alkylerende chemotherapeutische middel dat wordt gebruikt bij de behandeling van glioblastoom. Dit selectieproces resulteert in een stabiel fenotype dat wordt gekenmerkt door een aanzienlijk verminderde gevoeligheid voor TMZ-geïnduceerde cytotoxiciteit in vergelijking met de oorspronkelijke lijn.
Mechanistisch gezien wordt TMZ-resistentie in U251 MG/TMZ-cellen vaak geassocieerd met opregulatie van O6-methylguanine-DNA-methyltransferase (MGMT), een verbeterd vermogen om DNA-schade te herstellen, veranderingen in mismatch-herstelroutes en activering van pro-overlevingssignaalcascades. Resistente cellen vertonen vaak verminderde apoptose na blootstelling aan TMZ, met verminderde caspase-activering en verzwakte betrokkenheid van mitochondriale routes. Bijkomende moleculaire aanpassingen kunnen onder meer bestaan uit ontregeling van PI3K/AKT-, MAPK-, NF-κB- of STAT3-signaalroutes, evenals veranderde expressie van geneesmiddelentransporters en stamcelgerelateerde markers, afhankelijk van het gebruikte selectieprotocol.
U251 MG/TMZ-cellen behouden hun hechtende groei met een astrocytaire morfologie die vergelijkbaar is met die van de oorspronkelijke lijn, maar vertonen hogere TMZ IC50-waarden en aanhoudende proliferatie onder medicijndruk. Dit model wordt veel gebruikt om mechanismen van verworven chemoresistentie te onderzoeken, biomarkers te identificeren die de therapeutische respons voorspellen, en nieuwe combinatiestrategieën te evalueren die gericht zijn op het overwinnen van TMZ-resistentie. Als zodanig biedt U251 MG/TMZ een klinisch relevant in vitro platform voor het bestuderen van behandelingsfalen en therapeutische kwetsbaarheid bij glioblastoom.
- Weefsel
- Hersenen
- Ziekte
- Astrocytoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Locatie van de primaire tumor (hersenen)
- Toepassingen
- Onderzoek naar resistentie tegen TMZ bij glioblastoom; mechanismen van verworven chemoresistentie; MGMT-overexpressie; het DNA-mismatch-reparatiepad; pro-overlevingssignaalroute PI3K/AKT/MAPK/NF-κB; evaluatie van middelen die TMZ-resistentie kunnen overwinnen; modellering van GBM-recidief; ontdekking van resistentiebio-markers
- Synoniemen
- U-251MG
- U-251-MG
- U-251_MG
- U251-MG
- U251MG
- U-251
- U251
- U251n
- U251N
- 251 MG
- 251MG
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- Zonder genetisch gemodificeerde organismen
- Details over de GGO-status
- No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Celtype
- Glia-cellen (astrocyten)
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 36 tot 48 uur (TMZ-resistente sublijnen vermenigvuldigen zich vaak langzamer dan de oorspronkelijke stam)
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- U251 MG/TMZ (Cytion-catalogusnummer 305884)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
05Expressie en vatbaarheid
- Mutatieprofiel
- TMZ-resistent
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Voeg aan het medium 10% FBS en 50 µM temozolomide (TMZ) toe.
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 3
- Zaaidichtheid
- 1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 75 jaar
- Etnische afkomst
- Kaukasisch
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja