Ga naar de inhoud
U251 MG/TMZ
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Astrocytoom
Plaats van uitzaaiingen
Locatie van de primaire tumor (hersenen)
Synoniemen
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Documenten

U251 MG/TMZ

Cell line · Productnummer 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

U251 MG/TMZ is een temozolomide-resistent derivaat van de menselijke glioblastoomcellijn U251 MG. De oorspronkelijke U251 MG-lijn is afkomstig van het kwaadaardige glioom van een volwassen patiënt en wordt veel gebruikt als model voor hooggradige astrocytaire tumoren. U251 MG/TMZ-cellen worden gegenereerd door stapsgewijze, langdurige blootstelling van de oorspronkelijke U251 MG-cellen aan toenemende concentraties temozolomide (TMZ), het standaard alkylerende chemotherapeutische middel dat wordt gebruikt bij de behandeling van glioblastoom. Dit selectieproces resulteert in een stabiel fenotype dat wordt gekenmerkt door een aanzienlijk verminderde gevoeligheid voor TMZ-geïnduceerde cytotoxiciteit in vergelijking met de oorspronkelijke lijn.

Mechanistisch gezien wordt TMZ-resistentie in U251 MG/TMZ-cellen vaak geassocieerd met opregulatie van O6-methylguanine-DNA-methyltransferase (MGMT), een verbeterd vermogen om DNA-schade te herstellen, veranderingen in mismatch-herstelroutes en activering van pro-overlevingssignaalcascades. Resistente cellen vertonen vaak verminderde apoptose na blootstelling aan TMZ, met verminderde caspase-activering en verzwakte betrokkenheid van mitochondriale routes. Bijkomende moleculaire aanpassingen kunnen onder meer bestaan uit ontregeling van PI3K/AKT-, MAPK-, NF-κB- of STAT3-signaalroutes, evenals veranderde expressie van geneesmiddelentransporters en stamcelgerelateerde markers, afhankelijk van het gebruikte selectieprotocol.

U251 MG/TMZ-cellen behouden hun hechtende groei met een astrocytaire morfologie die vergelijkbaar is met die van de oorspronkelijke lijn, maar vertonen hogere TMZ IC50-waarden en aanhoudende proliferatie onder medicijndruk. Dit model wordt veel gebruikt om mechanismen van verworven chemoresistentie te onderzoeken, biomarkers te identificeren die de therapeutische respons voorspellen, en nieuwe combinatiestrategieën te evalueren die gericht zijn op het overwinnen van TMZ-resistentie. Als zodanig biedt U251 MG/TMZ een klinisch relevant in vitro platform voor het bestuderen van behandelingsfalen en therapeutische kwetsbaarheid bij glioblastoom.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Astrocytoom
Plaats van uitzaaiingen
Locatie van de primaire tumor (hersenen)
Toepassingen
Onderzoek naar resistentie tegen TMZ bij glioblastoom; mechanismen van verworven chemoresistentie; MGMT-overexpressie; het DNA-mismatch-reparatiepad; pro-overlevingssignaalroute PI3K/AKT/MAPK/NF-κB; evaluatie van middelen die TMZ-resistentie kunnen overwinnen; modellering van GBM-recidief; ontdekking van resistentiebio-markers
Synoniemen
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Glia-cellen (astrocyten)
Verdubbelingstijd
ongeveer 36 tot 48 uur (TMZ-resistente sublijnen vermenigvuldigen zich vaak langzamer dan de oorspronkelijke stam)

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
U251 MG/TMZ (Cytion-catalogusnummer 305884)
NCBI-belastingnummer
9606

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
TMZ-resistent

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 10% FBS en 50 µM temozolomide (TMZ) toe.
Dissociatiereagens
Accutase
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
75 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch