U251 MG/TMZ

U251 MG/TMZ jest pochodną ludzkiej linii komórek glejaka wielopostaciowego U251 MG, oporną na temozolomid. Rodzicielska linia U251 MG została wyhodowana z nowotworu złośliwego u dorosłego pacjenta i jest szeroko stosowana jako model nowotworów astrocytowych wysokiego stopnia złośliwości. Komórki U251 MG/TMZ są wytwarzane poprzez stopniową, długotrwałą ekspozycję komórek macierzystych U251 MG na rosnące stężenia temozolomidu (TMZ), standardowego środka chemioterapeutycznego alkilującego stosowanego w leczeniu glejaka wielopostaciowego. Proces selekcji skutkuje stabilnym fenotypem charakteryzującym się znacznie zmniejszoną wrażliwością na cytotoksyczność wywołaną przez TMZ w porównaniu z linią macierzystą.

Pod względem mechanicznym oporność komórek U251 MG/TMZ na TMZ jest powszechnie związana z regulacją w górę O6-metyloguaniny-DNA metylotransferazy (MGMT), zwiększoną zdolnością naprawy uszkodzeń DNA, zmianami w szlakach naprawy niedopasowań oraz aktywacją kaskad sygnałów sprzyjających przeżyciu. Komórki oporne często wykazują zmniejszoną apoptozę po ekspozycji na TMZ, wraz ze zmniejszoną aktywacją kaspaz i osłabionym zaangażowaniem szlaku mitochondrialnego. Dodatkowe adaptacje molekularne mogą obejmować zaburzenia regulacji szlaków sygnałowych PI3K/AKT, MAPK, NF-κB lub STAT3, a także zmienioną ekspresję transporterów leków i markerów związanych z komórkami macierzystymi, w zależności od zastosowanego protokołu selekcji.

Komórki U251 MG/TMZ zachowują przylegający wzrost z morfologią astrocytów podobną do linii macierzystej, ale wykazują wyższe wartości IC50 TMZ i utrzymują proliferację pod presją leku. Model ten jest szeroko stosowany do badania mechanizmów nabytej oporności na chemioterapię, identyfikacji biomarkerów pozwalających przewidzieć odpowiedź na leczenie oraz oceny nowych strategii kombinacyjnych mających na celu przezwyciężenie oporności na TMZ. W związku z tym U251 MG/TMZ stanowi klinicznie istotną platformę in vitro do badania niepowodzeń leczenia i wrażliwości terapeutycznej w przypadku glejaka wielopostaciowego.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym