U251 MG/TMZ

U251 MG/TMZ è un derivato resistente alla temozolomide della linea cellulare umana di glioblastoma U251 MG. La linea parentale U251 MG è stata creata dal glioma maligno di un paziente adulto ed è ampiamente utilizzata come modello di tumori astrocitici di alto grado. Le cellule U251 MG/TMZ sono generate attraverso l'esposizione graduale e a lungo termine delle cellule parentali U251 MG a concentrazioni crescenti di temozolomide (TMZ), l'agente chemioterapico alchilante standard utilizzato nel trattamento del glioblastoma. Questo processo di selezione porta a un fenotipo stabile caratterizzato da una sensibilità significativamente ridotta alla citotossicità indotta dalla TMZ rispetto alla linea parentale.

Dal punto di vista meccanicistico, la resistenza alla TMZ nelle cellule U251 MG/TMZ è comunemente associata alla sovraregolazione della O6-metilguanina-DNA metiltransferasi (MGMT), a una maggiore capacità di riparazione del danno al DNA, ad alterazioni nei percorsi di riparazione dei mismatch e all'attivazione di cascate di segnalazione pro-sopravvivenza. Le cellule resistenti mostrano spesso una riduzione dell'apoptosi in seguito all'esposizione al TMZ, con una diminuzione dell'attivazione delle caspasi e un coinvolgimento attenuato della via mitocondriale. Ulteriori adattamenti molecolari possono includere la disregolazione delle vie di segnalazione PI3K/AKT, MAPK, NF-κB o STAT3, nonché l'alterazione dell'espressione dei trasportatori di farmaci e dei marcatori associati alla stemness, a seconda del protocollo di selezione utilizzato.

Le cellule U251 MG/TMZ mantengono una crescita aderente con morfologia astrocitica simile alla linea parentale, ma dimostrano valori IC50 di TMZ più elevati e una proliferazione sostenuta sotto la pressione del farmaco. Questo modello è ampiamente utilizzato per studiare i meccanismi di chemioresistenza acquisita, identificare biomarcatori predittivi della risposta terapeutica e valutare nuove strategie combinatorie volte a superare la resistenza al TMZ. In quanto tale, U251 MG/TMZ fornisce una piattaforma in vitro clinicamente rilevante per lo studio del fallimento terapeutico e della vulnerabilità terapeutica nel glioblastoma.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia