Siirry sisältöön
U251 MG/TMZ
Kudos
Aivot
Sairaus
Astrosytooma
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvainpaikka (aivot)
Synonyymit
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Asiakirjat

U251 MG/TMZ

Cell line · Tuotenumero 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

U251 MG/TMZ on temotsolomidiresistentti johdannainen ihmisen glioblastoomasolulinjasta U251 MG. Emosolulinja U251 MG on peräisin aikuispotilaan pahanlaatuisesta glioomasta, ja sitä käytetään laajalti korkea-asteisten astrosyyttisten kasvainten mallina. U251 MG/TMZ-solut tuotetaan altistamalla emosoluja U251 MG vaiheittain ja pitkäaikaisesti kasvaville temotsolomidipitoisuuksille (TMZ), joka on glioblastooman hoidossa käytetty tavanomainen alkyloiva kemoterapeuttinen aine. Tämä valintaprosessi johtaa vakaaseen fenotyyppiin, jolle on ominaista huomattavasti vähentynyt herkkyys TMZ:n aiheuttamalle sytotoksisuudelle verrattuna emosoluun.

Mekanistisesti U251 MG/TMZ-solujen TMZ-resistenssi liittyy yleisesti O6-metyyliguanidiini-DNA-metyylitransferaasin (MGMT) yliekspressioon, parannettuun DNA-vaurioiden korjauskykyyn, muutoksiin epäsuhtaisten parien korjausreiteissä ja eloonjäämistä edistävien signaalikaskadien aktivoitumiseen. Resistentit solut osoittavat usein vähentynyttä apoptoosia TMZ-altistuksen jälkeen, kaspaasin aktivaation vähenemistä ja heikentynyttä mitokondrioiden reitin osallistumista. Muita molekyylisiä sopeutumia voivat olla PI3K/AKT-, MAPK-, NF-κB- tai STAT3-signaalireittien säätelyn häiriöt sekä lääkeaineiden kuljettajien ja kantasolujen merkkiaineiden ilmentymisen muutokset, riippuen käytetystä valintaprotokollasta.

U251 MG/TMZ-solut säilyttävät adheesion ja astrosyyttimorfologian, joka on samanlainen kuin emolinjalla, mutta niillä on korkeammat TMZ IC50-arvot ja jatkuva proliferaatio lääkeaineen paineessa. Tätä mallia käytetään laajalti hankitun kemoresistenssin mekanismien tutkimiseen, terapeuttisen vasteen ennustavien biomarkkerien tunnistamiseen ja TMZ-resistenssin voittamiseen tähtäävien uusien yhdistelmästrategioiden arviointiin. Siten U251 MG/TMZ tarjoaa kliinisesti merkityksellisen in vitro -alustan glioblastooman hoidon epäonnistumisen ja terapeuttisen haavoittuvuuden tutkimiseen.

Kudos
Aivot
Sairaus
Astrosytooma
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvainpaikka (aivot)
Sovellukset
Glioblastooman TMZ-resistenssin tutkimus; hankitun kemoresistenssin mekanismit; MGMT-geenin yli-ilmentyminen; DNA:n mismatch-korjausreitti; PI3K/AKT/MAPK/NF-κB-selviytymistä edistävä signalointireitti; TMZ-resistenssin voittavien lääkeaineiden arviointi; GBM:n uusiutumisen mallintaminen; resistenssin biomarkkerien löytäminen
Synonyymit
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Glia-solut (astrocytit)
Kaksinkertaistumisaika
noin 36–48 tuntia (TMZ-resistentit alalinjat lisääntyvät usein hitaammin kuin emolinja)

04Tunnisteet

Lähdeviite
U251 MG/TMZ (Cytion-tuotenumero 305884)
NCBI-verotunnus
9606

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
TMZ-kestävä

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää väliaineeseen 10 % FBS ja 50 µM temotsolomidi (TMZ).
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
75 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen