Gå direkte til indholdet
U251 MG/TMZ
Væv
Hjerne
Sygdom
Astrocytom
Metastasested
Primær tumorlokalisation (hjerne)
Synonymer
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumenter

U251 MG/TMZ

Cell line · Varenummer 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

U251 MG/TMZ er et temozolomid-resistent derivat af den humane glioblastomcellelinje U251 MG. Den oprindelige U251 MG-linje blev etableret ud fra en voksen patients maligne gliom og bruges i vid udstrækning som model for højgradige astrocytiske tumorer. U251 MG/TMZ-celler genereres gennem trinvis, langvarig eksponering af den oprindelige U251 MG-celle for stigende koncentrationer af temozolomid (TMZ), det standardalkylerende kemoterapeutiske middel, der anvendes til behandling af glioblastom. Denne selektionsproces resulterer i en stabil fænotype, der er kendetegnet ved en signifikant reduceret følsomhed over for TMZ-induceret cytotoksicitet sammenlignet med den oprindelige linje.

Mekanisk set er TMZ-resistens i U251 MG/TMZ-celler almindeligvis forbundet med opregulering af O6-methylguanin-DNA-metyltransferase (MGMT), forbedret DNA-skadesreparationskapacitet, ændringer i mismatch-reparationsveje og aktivering af pro-overlevelsessignalkaskader. Resistente celler udviser ofte reduceret apoptose efter TMZ-eksponering, med nedsat caspase-aktivering og svækket mitokondrievej-engagement. Yderligere molekylære tilpasninger kan omfatte dysregulering af PI3K/AKT-, MAPK-, NF-κB- eller STAT3-signalveje samt ændret ekspression af lægemiddeltransportører og stamcelleassocierede markører, afhængigt af den anvendte selektionsprotokol.

U251 MG/TMZ-celler opretholder adhærent vækst med astrocytisk morfologi svarende til den oprindelige linje, men udviser højere TMZ IC50-værdier og vedvarende proliferation under lægemiddelpres. Denne model er vidt anvendt til at undersøge mekanismer for erhvervet kemoresistens, identificere biomarkører, der kan forudsige terapeutisk respons, og evaluere nye kombinationsstrategier, der sigter mod at overvinde TMZ-resistens. Som sådan udgør U251 MG/TMZ en klinisk relevant in vitro-platform til undersøgelse af behandlingssvigt og terapeutisk sårbarhed i glioblastom.

Væv
Hjerne
Sygdom
Astrocytom
Metastasested
Primær tumorlokalisation (hjerne)
Anvendelser
Forskning i TMZ-resistens ved glioblastom; mekanismer bag erhvervet kemoresistens; MGMT-overekspression; DNA-mismatch-reparationsvejen; PI3K/AKT/MAPK/NF-κB-signalvejen, der fremmer overlevelse; evaluering af lægemidler, der overvinder TMZ-resistens; modellering af GBM-recidiv; opdagelse af biomarkører for resistens
Synonymer
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Gliaceller (astrocytter)
Fordoblingstid
ca. 36 til 48 timer (TMZ-resistente sublinjer formerer sig ofte langsommere end forældrelinjen)

04Identifikatorer

Kildehenvisning
U251 MG/TMZ (Cytion-katalognummer 305884)
NCBI-skattenummer
9606

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
TMZ-resistent

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilføj 10 % FBS og 50 µM temozolomid (TMZ) til mediet.
Dissociationsreagens
Accutase
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
75 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk