U251 MG/TMZ

U251 MG/TMZ est un dérivé résistant au témozolomide de la lignée cellulaire humaine de glioblastome U251 MG. La lignée parentale U251 MG a été établie à partir du gliome malin d’un patient adulte et est largement utilisée comme modèle de tumeurs astrocytaires de haut grade. Les cellules U251 MG/TMZ sont générées par une exposition progressive et à long terme des cellules parentales U251 MG à des concentrations croissantes de témozolomide (TMZ), l’agent chimiothérapeutique alkylant standard utilisé dans le traitement du glioblastome. Ce processus de sélection aboutit à un phénotype stable caractérisé par une sensibilité considérablement réduite à la cytotoxicité induite par le TMZ par rapport à la lignée parentale.

Sur le plan mécanistique, la résistance au TMZ des cellules U251 MG/TMZ est généralement associée à une surexpression de la O6-méthylguanine-ADN-méthyltransférase (MGMT), à une capacité accrue de réparation des dommages à l’ADN, à des altérations des voies de réparation des mésappariements et à l’activation de cascades de signalisation favorisant la survie. Les cellules résistantes présentent souvent une apoptose réduite après exposition au TMZ, avec une activation diminuée des caspases et une activation atténuée de la voie mitochondriale. D’autres adaptations moléculaires peuvent inclure une dérégulation des voies de signalisation PI3K/AKT, MAPK, NF-κB ou STAT3, ainsi qu’une expression altérée des transporteurs de médicaments et des marqueurs associés aux propriétés souches, selon le protocole de sélection utilisé.

Les cellules U251 MG/TMZ conservent une croissance adhérente avec une morphologie astrocytaire similaire à celle de la lignée parentale, mais présentent des valeurs de CI₅₀ plus élevées pour le TMZ et une prolifération soutenue sous pression médicamenteuse. Ce modèle est largement utilisé pour étudier les mécanismes de la chimiorésistance acquise, identifier des biomarqueurs prédictifs de la réponse thérapeutique et évaluer de nouvelles stratégies combinatoires visant à surmonter la résistance au TMZ. À ce titre, la lignée U251 MG/TMZ offre une plateforme in vitro cliniquement pertinente pour l’étude de l’échec thérapeutique et de la vulnérabilité thérapeutique dans le glioblastome.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.