Pāriet uz saturu
U251 MG/TMZ
Audums
Smadzenes
Slimība
Astrocitoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (smadzenes)
Sinonīmi
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumenti

U251 MG/TMZ

Cell line · Preces numurs 305884

U251 MG/TMZ is a temozolomide-resistant derivative of the human glioblastoma cell line U251 MG. The parental U251 MG line was established from the maligna...

€1,200.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

U251 MG/TMZ ir temozolomīdam rezistents cilvēka glioblastomas šūnu līnijas U251 MG atvasinājums. Mātes U251 MG līnija tika izveidota no pieaugušā pacienta ļaundabīgās gliomas un tiek plaši izmantota kā augstas pakāpes astrocitāro audzēju modelis. U251 MG/TMZ šūnas tiek radītas, pakāpeniski un ilgstoši pakļaujot vecāko U251 MG šūnu pieaugošām temozolomīda (TMZ) koncentrācijām, kas ir standarta alkilējošs ķīmijterapijas līdzeklis, ko izmanto glioblastomas ārstēšanā. Šis atlases process rada stabilu fenotipu, kam raksturīga ievērojami samazināta jutība pret TMZ izraisītu citotoksicitāti salīdzinājumā ar vecāko līniju.

Mehāniski TMZ rezistence U251 MG/TMZ šūnās parasti ir saistīta ar O6-metilguanīna-DNS metiltransferāzes (MGMT) regulācijas paaugstināšanos, uzlabotu DNS bojājumu reparācijas spēju, izmaiņām nesakritības reparācijas ceļos un izdzīvošanas signālu kaskāžu aktivizēšanu. Rezistentās šūnas bieži uzrāda samazinātu apoptozi pēc TMZ iedarbības, ar samazinātu kazeāzes aktivāciju un vājinātu mitohondriālo ceļu iesaistīšanos. Papildu molekulārās adaptācijas var ietvert PI3K/AKT, MAPK, NF-κB vai STAT3 signālu ceļu disregulāciju, kā arī izmainītu zāļu transportētāju un ar cilmes šūnām saistītu marķieru ekspresiju, atkarībā no izmantotā atlases protokola.

U251 MG/TMZ šūnas saglabā adhezīvu augšanu ar astrocītu morfoloģiju, kas līdzīga vecāku līnijai, bet uzrāda augstākas TMZ IC50 vērtības un ilgstošu proliferāciju zāļu spiediena ietekmē. Šis modelis tiek plaši izmantots, lai pētītu iegūtās ķīmijterapijas rezistences mehānismus, identificētu biomarķierus, kas paredz terapeitisko reakciju, un novērtētu jaunas kombinētās stratēģijas, kuru mērķis ir pārvarēt TMZ rezistenci. Tādējādi U251 MG/TMZ nodrošina klīniski nozīmīgu in vitro platformu glioblastomas ārstēšanas neveiksmes un terapeitiskās neaizsargātības pētīšanai.

Audums
Smadzenes
Slimība
Astrocitoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (smadzenes)
Pieteikumi
Pētījumi par glioblastomas rezistenci pret TMZ; iegūtās ķīmijterapijas rezistences mehānismi; MGMT pārmērīga ekspresija; DNS nesakritības reparācijas ceļš; PI3K/AKT/MAPK/NF-κB izdzīvošanas veicinošā signālceļa darbība; tādu zāļu novērtēšana, kas pārvar rezistenci pret TMZ; GBM recidīvu modelēšana; rezistences biomarķieru atklāšana
Sinonīmi
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; TMZ resistance acquired by stepwise selection under increasing TMZ concentrations (non-engineered phenotype)
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Gliālās šūnas (astrocīti)
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 36 līdz 48 stundas (TMZ rezistentās apakšlīnijas bieži vairojas lēnāk nekā sākotnējās)

04Identifikatori

Atsauce
U251 MG/TMZ (Cytion kataloga numurs 305884)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
TMZ izturīgs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % FBS un 50 µM temozolomīdu (TMZ).
Disociācijas reaģents
Accutase
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
75 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis