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Cellules NCH690
Cell line · Product number 300120
The NCH640 cell line is a glioblastoma stem-like cell model used in research to explore the mechanisms of tumor resistance, cellular survival under stress...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire NCH640 est un modèle de cellules de type souche de glioblastome utilisé en recherche pour étudier les mécanismes de résistance tumorale, la survie cellulaire en situation de stress et les réponses thérapeutiques. Le glioblastome, l’une des formes les plus agressives de tumeurs cérébrales, est difficile à traiter en raison de sa résistance aux traitements et de son adaptation à un microenvironnement hostile. La lignée NCH640 est cultivée dans des milieux spécialisés tels que le Neurobasal A, enrichi de suppléments comme le B27, et sa croissance est favorisée par des facteurs de croissance essentiels comme l’EGF et le FGF-2. Elle est souvent utilisée conjointement avec d’autres modèles de cellules souches de gliome, tels que les lignées NCH690 et NCH644, pour étudier ces phénomènes biologiques.
La recherche sur la lignée NCH640 se concentre principalement sur ses mécanismes de résistance, en particulier dans des conditions hypoxiques. Les cellules de gliome telles que la lignée NCH640 dépendent fortement d’adaptations métaboliques, notamment d’une régulation altérée des espèces réactives de l’oxygène (ERO). Des études ont démontré que le ciblage de voies telles que la réponse intégrée au stress (ISR) chez la lignée NCH640 et les lignées cellulaires apparentées pourrait améliorer leur sensibilité à des traitements comme la témozolomide, couramment utilisée dans le traitement du glioblastome. Ces résultats sont importants pour l’élaboration de nouvelles stratégies visant à surmonter la résistance inhérente des cellules de type souche de gliome aux interventions thérapeutiques standard.
- Tissue
- Cerveau
- Disease
- Glioblastome
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Tumourigenic
- Oui
04Identifiers
- Citation
- NCH690 (numéro de catalogue Cytion 300120)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x915
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 5 mg/L d’héparine, 20 ng/mL de bFGF, 20 microgrammes/L d’EGF, 5 mg/L d’insuline, 100 mg/L de transferrine, 5,2 microgrammes/L de sélénite de sodium, 6,3 microgrammes/L de progestérone, 161,1 microgrammes/L de putrescine et 50 mg/L d’hydrocortisone
- Subculturing
- Pour la repiquage de cultures de sphéroïdes, commencez par dissocier mécaniquement les sphéroïdes en effectuant 5 à 10 mouvements de pipetage de haut en bas à l’aide d’une pipette Eppendorf munie d’embouts filtrants de 1 000 μl. Ensuite, centrifugez le mélange à 300 g pendant 5 minutes à température ambiante pour obtenir un culot cellulaire. Éliminez le surnageant et remettez le culot cellulaire en suspension dans un milieu de culture frais. Enfin, transférez les cellules remises en suspension dans de nouveaux récipients de culture afin de favoriser la poursuite de la formation de sphéroïdes. Cette approche garantit une désagrégation efficace des sphéroïdes et les prépare à poursuivre leur croissance dans un nouvel environnement.
- Seeding density
- 1 × 10⁵ cellules/mL
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Après la décongélation, laissez les cellules se remettre du processus de congélation pendant au moins 24 à 48 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un mélange composé de 50 % de milieu de base + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou du CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés afin d’améliorer la récupération et de réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- 78 ans
- Ethnicity
- caucasien
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Third-party agreements apply
- Yes