Přejít na obsah
Buňky NCH690
Tkáň
Mozek
Nemoc
Glioblastom

Dokumenty

Buňky NCH690

Cell line · Číslo výrobku 300120

Buněčná linie NCH640 je model buněk podobných kmenovým buňkám glioblastomu, který se ve výzkumu využívá ke zkoumání mechanismů rezistence nádorů, přežití buněk ve stresových podmínkách...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie NCH640 je model kmenových buněk glioblastomu, který se používá ve výzkumu ke zkoumání mechanismů nádorové rezistence, přežívání buněk při zátěži a terapeutických reakcí. Glioblastom, jedna z nejagresivnějších forem mozkových nádorů, je obtížně léčitelný kvůli své rezistenci vůči terapii a adaptaci na nepřátelské mikroprostředí. NCH640 se kultivuje ve specializovaných médiích, jako je Neurobasal A s doplňky, jako je B27, a jeho růst je podporován základními růstovými faktory, jako jsou EGF a FGF-2. Ke zkoumání těchto biologických jevů se často používá spolu s dalšími modely gliomových kmenových buněk, jako jsou NCH690 a NCH644.

Výzkum NCH640 se výrazně zaměřuje na mechanismy jeho rezistence, zejména za hypoxických podmínek. Gliomové buňky jako NCH640 vykazují značnou závislost na metabolických adaptacích, včetně změněné regulace reaktivních forem kyslíku (ROS). Studie prokázaly, že cílené ovlivnění drah, jako je integrovaná stresová reakce (ISR), u buněčných linií NCH640 a příbuzných buněk může zlepšit jejich citlivost na léčbu, jako je temozolomid, který se běžně používá při léčbě glioblastomu. Tato zjištění jsou důležitá pro vypracování nových strategií k překonání přirozené rezistence gliomových kmenových buněk vůči standardním terapeutickým zásahům.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Glioblastom

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ano

04Identifikátory

Citace
NCH690 (katalogové číslo Cytion 300120)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Do média přidejte 5 mg/l heparinu, 20 ng/ml bFGF, 20 mikrogramů/l EGF, 5 mg/l inzulínu, 100 mg/l transferinu, 5,2 mikrogramu/l selenitu sodného, 6,3 mikrogramu/l progesteronu, 161,1 mikrogramu/l putrescinu a 50 mg/l hydrokortizonu
Subkultivace
Při subkultivaci sféroidních kultur začněte mechanickou disociací sféroidů pipetováním 5 až 10krát nahoru a dolů pomocí pipety Eppendorf s filtračními špičkami o objemu 1000 μl. Poté směs odstřeďte při 300 g po dobu 5 minut při pokojové teplotě, aby se buňky peletovaly. Supernatant zlikvidujte a buněčnou peletu znovu rozpusťte v čerstvém kultivačním médiu. Nakonec přeneste resuspendované buňky do nových kultivačních nádob, abyste podpořili další tvorbu sféroidů. Tento postup zajišťuje účinné rozdělení sféroidů a připravuje je na další růst v novém prostředí
Hustota výsevu
1 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení nechte buňky alespoň 24 až 48 hodin zotavovat z procesu zmrazování.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
78 let
Etnická příslušnost
Kavkazský