الانتقال إلى المحتوى
خلايا NCH690 NCH690
الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

المستندات

خلايا NCH690 NCH690

Cell line · رقم المنتج 300120

يُعد خط الخلايا NCH640 نموذجًا للخلايا الشبيهة بالخلايا الجذعية لورم الأورام الدبقية، ويُستخدم في الأبحاث لاستكشاف آليات مقاومة الورم، وبقاء الخلايا في ظل الإجهاد...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا NCH640 هو نموذج خلية شبيهة بالورم الأرومي الدبقي الجذعي يستخدم في الأبحاث لاستكشاف آليات مقاومة الورم وبقاء الخلايا تحت الضغط والاستجابات العلاجية. يصعب علاج الورم الأرومي الدبقي، وهو أحد أكثر أشكال أورام الدماغ شراسة، بسبب مقاومته للعلاج والتكيف مع البيئة الدقيقة المعادية. يتم استزراع الورم الأرومي الدبقي الدبقي 640 في وسائط متخصصة مثل Neurobasal A مع مكملات مثل B27، ويتم دعم نموه بعوامل النمو الأساسية مثل EGF وFGF-2. وغالبًا ما يتم استخدامه إلى جانب نماذج أخرى من الخلايا الجذعية للورم الدبقي مثل NCH690 وNCH644، لدراسة هذه الظواهر البيولوجية.

يركز البحث على NCH640 بشكل كبير على آليات مقاومته، خاصة في ظل ظروف نقص الأكسجين. تُظهر خلايا الورم الدبقي مثل NCH640 اعتمادًا كبيرًا على التكيفات الأيضية، بما في ذلك تغيير تنظيم أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS). وقد أثبتت الدراسات أن استهداف مسارات مثل الاستجابة المتكاملة للإجهاد (ISR) في NCH640 وخطوط الخلايا ذات الصلة قد يحسن من حساسيتها للعلاجات مثل التيموزولوميد، الذي يستخدم عادة في علاج الورم الأرومي الدبقي. وتعد هذه النتائج مهمة لاستنباط استراتيجيات جديدة للتغلب على المقاومة المتأصلة للخلايا الشبيهة بالورم الدبقي الجذعي للتدخلات العلاجية القياسية.

الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

مُسبِّب للأورام
نعم

04المعرّفات

المرجع
NCH690 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300120)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_x915

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 5 ملغ/لتر من الهيبارين، و20 نانوغرام/مل من bFGF، و20 ميكروغرام/لتر من EGF، 5 ملغ/لتر من الأنسولين، و100 ملغ/لتر من الترانسفيرين، و5,2 ميكروغرام/لتر من سيلينيت الصوديوم، و6,3 ميكروغرام/لتر من البروجسترون، و161,1 ميكروغرام/لتر من البوتريسين، و50 ملغ/لتر من الهيدروكورتيزون
إعادة الاستنبات
لزراعة مزارع الخلايا الكروية الفرعية، ابدأ بتفكيك الأجسام الكروية ميكانيكياً من خلال السحب لأعلى ولأسفل من 5 إلى 10 مرات باستخدام ماصة إيبندورف مع أطراف مرشح 1000 ميكرولتر. بعد ذلك، يُطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة لتكوير الخلايا. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق كريات الخلايا في وسط مستنبت جديد. وأخيراً، انقل الخلايا المعاد تعليقها إلى أوعية استزراع جديدة لتعزيز تكوين المزيد من الخلايا الكروية. تضمن هذه الطريقة تكسير الخلايا الكروية بكفاءة وتهيئتها للنمو المستمر في بيئة جديدة
كثافة البذر
1 × 105 خلية/مل
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان اترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد لمدة 24 إلى 48 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
78 سنة
الأصل العرقي
قوقازي