Tartalomra ugrás
NCH690 sejtek
Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma

Dokumentumok

NCH690 sejtek

Cell line · Termékszám 300120

Az NCH640 sejtvonal egy glioblastoma őssejtszerű sejtmodell, amelyet a kutatásban a tumorrezisztencia mechanizmusainak, valamint a stresszhelyzetben történő sejt túlélésnek a feltárására használnak...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCH640 sejtvonal egy glioblasztóma őssejt-szerű sejtmodell, amelyet a kutatásban a tumorrezisztencia, a stressz alatti sejttúlélés és a terápiás válaszok mechanizmusainak feltárására használnak. A glioblasztóma, az agydaganatok egyik legagresszívebb formája, nehezen kezelhető a terápiával szembeni rezisztencia és az ellenséges mikrokörnyezethez való alkalmazkodás miatt. Az NCH640-et speciális táptalajban, például Neurobasal A-ban tenyésztik, olyan kiegészítőkkel, mint a B27, és növekedését olyan alapvető növekedési faktorok támogatják, mint az EGF és az FGF-2. Gyakran használják más glióma őssejtmodellekkel, például az NCH690 és az NCH644 modellel együtt e biológiai jelenségek vizsgálatára.

Az NCH640-re vonatkozó kutatások nagymértékben összpontosítanak a rezisztencia mechanizmusaira, különösen hipoxiás körülmények között. Az NCH640-hez hasonló glióma sejtek jelentős mértékben támaszkodnak a metabolikus adaptációkra, beleértve a reaktív oxigénfajok (ROS) megváltozott szabályozását. Vizsgálatok kimutatták, hogy az NCH640 és a rokon sejtvonalakban az olyan útvonalak, mint az integrált stresszválasz (ISR) célzott kezelése javíthatja az olyan terápiákkal szembeni érzékenységüket, mint a glioblasztóma kezelésében gyakran alkalmazott temozolomid. Ezek az eredmények fontosak olyan új stratégiák kidolgozásához, amelyekkel leküzdhető a glióma őssejtek eredendő rezisztenciája a standard terápiás beavatkozásokkal szemben.

Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
NCH690 (Cytion katalógusszám: 300120)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A tápközeget egészítsük ki 5 mg/L heparinnal, 20 ng/mL bFGF-fel, 20 mikrogramm/L EGF-fel, 5 mg/L inzulinnal, 100 mg/L transzferrinnel, 5,2 mikrogramm/L Na-szelenittal, 6,3 mikrogramm/L progeszteronnal, 161,1 mikrogramm/L putrescinnel, 50 mg/L hidrokortizonnal
Átültetés
A szferoidkultúrák szubkultiválásához kezdje a szferoidok mechanikus disszociációjával, 5-10 alkalommal történő fel-le pipettázással, 1000 μl-es szűrőhegyekkel ellátott Eppendorf pipettával. Ezt követően a sejtek pelletálásához centrifugálja az elegyet 300 g-nél 5 percig szobahőmérsékleten. Dobja el a felülúszót, és szuszpendálja újra a sejtpelletet friss táptalajban. Végül a reszuszpendált sejteket helyezze át új tenyésztőedényekbe a további szferoidképződés elősegítése érdekében. Ez a megközelítés biztosítja a szferoidok hatékony lebomlását, és felkészíti őket az új környezetben történő további növekedésre
Ültetési sűrűség
1 x 105 sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
A felolvasztás után hagyja, hogy a sejtek legalább 24-48 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
78 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi