Skip to content
NCH690 เซลล์
Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา

Documents

NCH690 เซลล์

Cell line · Product number 300120

The NCH640 cell line is a glioblastoma stem-like cell model used in research to explore the mechanisms of tumor resistance, cellular survival under stress...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ NCH640 เป็นแบบจำลองเซลล์ที่มีลักษณะคล้ายเซลล์ต้นกำเนิดของเนื้องอกชนิดกลิโอบลาสโตมา ซึ่งใช้ในการวิจัยเพื่อศึกษาวิถีการต้านทานของเนื้องอก การอยู่รอดของเซลล์ภายใต้สภาวะเครียด และการตอบสนองต่อการรักษา กลิโอบลาสโตมา ซึ่งเป็นหนึ่งในเนื้องอกในสมองที่มีความรุนแรงมากที่สุด มีความยากในการรักษาเนื่องจากความต้านทานต่อการรักษาและการปรับตัวต่อสภาพแวดล้อมที่ไม่เอื้ออำนวยNCH640 ถูกเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อเฉพาะทาง เช่น Neurobasal A พร้อมสารเสริมอย่าง B27 และการเจริญเติบโตได้รับการสนับสนุนโดยปัจจัยการเจริญเติบโตที่จำเป็น เช่น EGF และ FGF-2 มักถูกใช้ร่วมกับแบบจำลองเซลล์ต้นกำเนิดของเนื้องอกในสมองชนิดอื่น ๆ เช่น NCH690 และ NCH644 เพื่อศึกษาปรากฏการณ์ทางชีวภาพเหล่านี้

การวิจัยเกี่ยวกับ NCH640 มุ่งเน้นอย่างมากที่กลไกการต้านทานของมัน โดยเฉพาะอย่างยิ่งภายใต้สภาวะขาดออกซิเจน เซลล์กลีโอมาเช่น NCH640 แสดงการพึ่งพาการปรับตัวทางเมตาบอลิซึมอย่างมีนัยสำคัญ รวมถึงการเปลี่ยนแปลงการควบคุมอนุมูลอิสระ (ROS)การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่าการมุ่งเป้าไปที่เส้นทาง เช่น การตอบสนองต่อความเครียดแบบบูรณาการ (ISR) ในเซลล์ NCH640 และสายเซลล์ที่เกี่ยวข้องอาจช่วยเพิ่มความไวต่อการรักษาด้วยเทโมโซโลไมด์ ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษามะเร็งสมองชนิดกลิโอบลาสโตมา ผลการค้นพบเหล่านี้มีความสำคัญต่อการคิดค้นกลยุทธ์ใหม่เพื่อเอาชนะความต้านทานโดยธรรมชาติของเซลล์ต้นกำเนิดมะเร็งสมองต่อการรักษาแบบมาตรฐาน

Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
NCH690 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300120)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารเสริมลงในสื่อเพาะเลี้ยง ได้แก่ เฮปาริน 5 มก./ลิตร, bFGF 20 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, EGF 20 ไมโครกรัม/ลิตร, 5 mg/L อินซูลิน, 100 mg/L ทรานสเฟอร์ริน, 5.2 ไมโครกรัม/L Na-selenit, 6.3 ไมโครกรัม/L โปรเจสเตอโรน, 161.1 ไมโครกรัม/L พูเทรสซิน, 50 mg/L ไฮโดรคอร์ติโซน
Subculturing
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ทรงกลมแบบย่อย ให้เริ่มต้นด้วยการแยกเซลล์ออกจากกันทางกลไกโดยการดูดและปล่อยของเหลวขึ้นลง 5 ถึง 10 ครั้ง โดยใช้ปิเปต Eppendorf พร้อมปลายกรองขนาด 1000 μl หลังจากนั้น นำส่วนผสมไปปั่นเหวี่ยงที่ความเร็ว 300g เป็นเวลา 5 นาที ที่อุณหภูมิห้อง เพื่อให้เซลล์ตกตะกอน กำจัดส่วนใสที่ลอยอยู่ด้านบนทิ้ง แล้วนำไปแขวนลอยเซลล์ที่ตกตะกอนในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่สุดท้าย ให้ถ่ายโอนเซลล์ที่แขวนลอยกลับเข้าไปในภาชนะเพาะเลี้ยงใหม่เพื่อส่งเสริมการก่อตัวของก้อนเซลล์ทรงกลมต่อไป วิธีการนี้ช่วยให้การสลายตัวของก้อนเซลล์ทรงกลมมีประสิทธิภาพและเตรียมพร้อมสำหรับการเจริญเติบโตต่อไปในสภาพแวดล้อมใหม่
Seeding density
1 x 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ถึง 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
78 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน