Ga naar de inhoud
NCH690 Cellen
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Glioblastoom

Documenten

NCH690 Cellen

Cell line · Productnummer 300120

De NCH640-cellijn is een glioblastoom-stamcelachtig celmodel dat in onderzoek wordt gebruikt om de mechanismen van tumorresistentie en celoverleving onder stress te bestuderen...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCH640 cellijn is een glioblastoma stamcelmodel dat gebruikt wordt in onderzoek om de mechanismen van tumorresistentie, cellulaire overleving onder stress en therapeutische reacties te onderzoeken. Glioblastoom, een van de meest agressieve vormen van hersentumoren, is moeilijk te behandelen vanwege de resistentie tegen therapie en de aanpassing aan een vijandige micro-omgeving. NCH640 wordt gekweekt in gespecialiseerde media zoals Neurobasal A met supplementen zoals B27, en zijn groei wordt ondersteund door essentiële groeifactoren zoals EGF en FGF-2. Het wordt vaak gebruikt naast andere glioma stamcelmodellen, zoals NCH690 en NCH644, om deze biologische fenomenen te onderzoeken.

Het onderzoek naar NCH640 richt zich vooral op de resistentiemechanismen, met name onder hypoxische omstandigheden. Gliomacellen zoals NCH640 zijn in hoge mate afhankelijk van metabole aanpassingen, waaronder een veranderde regulatie van reactieve zuurstofsoorten (ROS). Studies hebben aangetoond dat het richten van pathways zoals de geïntegreerde stressrespons (ISR) in NCH640 en verwante cellijnen hun gevoeligheid voor therapieën zoals temozolomide, dat vaak wordt gebruikt bij de behandeling van glioblastoom, kan verbeteren. Deze bevindingen zijn belangrijk voor het bedenken van nieuwe strategieën om de inherente resistentie van glioma stamcellen tegen standaard therapeutische interventies te overwinnen.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Glioblastoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCH690 (Cytion catalogusnummer 300120)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 5 mg/L heparine, 20 ng/mL bFGF, 20 microgram/L EGF, 5 mg/L insuline, 100 mg/L transferrine, 5,2 microgram/L natriumseleniet, 6,3 microgram/L progesteron, 161,1 microgram/L putrescine, 50 mg/L hydrocortison
Heruitplanten
Voor subcultuur sferoïde culturen, beginnen met het mechanisch scheiden van de sferoïden door pipetteren op en neer 5 tot 10 keer met behulp van een Eppendorf pipet met 1000 ul filtertips. Hierna centrifugeer je het mengsel bij 300g gedurende 5 minuten bij kamertemperatuur om de cellen te pelleteren. Gooi het supernatant weg en resuspendeer de celpellet in vers kweekmedium. Breng ten slotte de geresuspendeerde cellen over in nieuwe kweekvaten om verdere sferoïdvorming te bevorderen. Deze aanpak zorgt voor een efficiënte afbraak van de sferoïden en maakt ze klaar voor verdere groei in een nieuwe omgeving
Zaaidichtheid
1 x 105 cellen/ml
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Laat de cellen na het ontdooien minstens 24 tot 48 uur bijkomen van het vriesproces.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
78 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch