Перейти до вмісту
Клітини NCH690
Тканина
Мозок
Хвороба
Гліобластома

Документи

Клітини NCH690

Cell line · Номер товару 300120

Клітинна лінія NCH640 — це модель клітин, схожих на стовбурові клітини гліобластоми, яка використовується в наукових дослідженнях для вивчення механізмів резистентності пухлин, виживання клітин у стресових умовах...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія NCH640 - це стовбурова модель гліобластоми, яка використовується в дослідженнях для вивчення механізмів пухлинної резистентності, виживання клітин в умовах стресу та терапевтичної відповіді. Гліобластома, одна з найагресивніших форм пухлин головного мозку, важко піддається лікуванню через свою стійкість до терапії та адаптацію до ворожого мікросередовища. NCH640 культивують у спеціалізованих середовищах, таких як Neurobasal A з добавками, такими як B27, і її ріст підтримується основними факторами росту, такими як EGF і FGF-2. Її часто використовують разом з іншими моделями стовбурових клітин гліоми, такими як NCH690 і NCH644, для дослідження цих біологічних явищ.

Дослідження NCH640 значною мірою зосереджені на механізмах її стійкості, особливо в умовах гіпоксії. Клітини гліоми, такі як NCH640, демонструють значну залежність від метаболічних адаптацій, включаючи змінену регуляцію активних форм кисню (АФК). Дослідження продемонстрували, що таргетування таких шляхів, як інтегрована відповідь на стрес (ІСР) у NCH640 та споріднених клітинних лініях, може підвищити їхню чутливість до терапії, наприклад, до темозоломіду, який широко використовується для лікування гліобластоми. Ці результати важливі для розробки нових стратегій подолання притаманної стовбуровим клітинам гліоми резистентності до стандартних терапевтичних втручань.

Тканина
Мозок
Хвороба
Гліобластома

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Пухлиноутворювальний
Так

04Ідентифікатори

Посилання
NCH690 (номер за каталогом Cytion 300120)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_x915

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 5 мг/л гепарину, 20 нг/мл bFGF, 20 мікрограмів/л EGF, 5 мг/л інсуліну, 100 мг/л трансферину, 5,2 мкг/л селеніту натрію, 6,3 мкг/л прогестерону, 161,1 мкг/л путресцину, 50 мг/л гідрокортизону
Пересадка в нове середовище
Для субкультивування культур сфероїдів почніть з механічної дисоціації сфероїдів шляхом піпетування вгору і вниз 5-10 разів за допомогою піпетки Еппендорфа з фільтрувальними насадками на 1000 мкл. Після цього центрифугуйте суміш при 300g протягом 5 хвилин при кімнатній температурі, щоб осадити клітини. Відкиньте надосадову рідину і ресуспендуйте осад клітин у свіжому живильному середовищі. Нарешті, перенесіть ресуспендовані клітини в нові культуральне середовище, щоб сприяти подальшому утворенню сфероїдів. Цей підхід забезпечує ефективне розщеплення сфероїдів і готує їх до подальшого росту в новому середовищі
Щільність висіву
1 x 105 клітин/мл
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування дайте клітинам відновитися після процесу заморожування принаймні 24-48 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо 50% базальне середовище + 40% FBS + 10% ДМСО або СМ-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для покращення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
78 років
Етнічна приналежність
Кавказець