Células NCH690
Cell line · Product number 300120
The NCH640 cell line is a glioblastoma stem-like cell model used in research to explore the mechanisms of tumor resistance, cellular survival under stress...
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01General information
- Description
A linhagem celular NCH640 é um modelo de células semelhantes às células-tronco do glioblastoma, utilizado em pesquisas para explorar os mecanismos de resistência tumoral, sobrevivência celular sob estresse e respostas terapêuticas. O glioblastoma, uma das formas mais agressivas de tumor cerebral, é difícil de tratar devido à sua resistência à terapia e à sua adaptação a um microambiente hostil. A NCH640 é cultivada em meios especializados, como o Neurobasal A com suplementos como o B27, e seu crescimento é sustentado por fatores de crescimento essenciais, como o EGF e o FGF-2. É frequentemente utilizada em conjunto com outros modelos de células-tronco de glioma, como a NCH690 e a NCH644, para investigar esses fenômenos biológicos.
A pesquisa sobre o NCH640 concentra-se fortemente em seus mecanismos de resistência, particularmente em condições hipóxicas. Células de glioma como o NCH640 demonstram dependência significativa de adaptações metabólicas, incluindo a regulação alterada das espécies reativas de oxigênio (ROS). Estudos demonstraram que o direcionamento de vias como a resposta integrada ao estresse (ISR) na NCH640 e em linhagens celulares relacionadas pode melhorar sua sensibilidade a terapias como a temozolomida, comumente utilizada no tratamento do glioblastoma. Essas descobertas são importantes para a elaboração de novas estratégias destinadas a superar a resistência inerente das células semelhantes a células-tronco de glioma às intervenções terapêuticas padrão.
- Tissue
- Cérebro
- Disease
- Glioblastoma
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Tumourigenic
- Sim
04Identifiers
- Citation
- NCH690 (número de catálogo da Cytion 300120)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x915
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 5 mg/L de heparina, 20 ng/mL de bFGF, 20 microgramas/L de EGF, 5 mg/L de insulina, 100 mg/L de transferrina, 5,2 microgramas/L de selenito de sódio, 6,3 microgramas/L de progesterona, 161,1 microgramas/L de putrescina e 50 mg/L de hidrocortisona
- Subculturing
- Para a subcultura de esferóides, comece dissociando-os mecanicamente por meio de pipetagem para cima e para baixo de 5 a 10 vezes, utilizando uma pipeta Eppendorf com pontas filtradas de 1000 μl. Em seguida, centrifugue a mistura a 300 g por 5 minutos à temperatura ambiente para precipitar as células. Descarte o sobrenadante e ressuspenda o sedimento celular em meio de cultura fresco. Por fim, transfira as células ressuspensas para novos recipientes de cultura, a fim de promover a formação de novos esferóides. Essa abordagem garante a dissociação eficiente dos esferóides e os prepara para o crescimento contínuo em um novo ambiente.
- Seeding density
- 1 x 105 células/mL
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, deixe as células se recuperarem do processo de congelamento por pelo menos 24 a 48 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Donor age
- 78 anos
- Ethnicity
- caucasiano
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Third-party agreements apply
- Yes
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