Gå direkt till innehållet
NCH690-celler
Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Glioblastom

NCH690-celler

Cell line · Produktnummer 300120

Cellinjen NCH640 är en glioblastom-stamcellsliknande cellmodell som används i forskningen för att undersöka mekanismerna bakom tumörresistens, cellöverlevnad under stress...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

NCH640-cellinjen är en glioblastomstamliknande cellmodell som används i forskning för att utforska mekanismerna för tumörresistens, cellöverlevnad under stress och terapeutiska svar. Glioblastom, som är en av de mest aggressiva formerna av hjärntumörer, är svårbehandlad på grund av sin terapiresistens och anpassning till en fientlig mikromiljö. NCH640 odlas i specialiserade medier som Neurobasal A med tillskott som B27, och dess tillväxt stöds av viktiga tillväxtfaktorer som EGF och FGF-2. Den används ofta tillsammans med andra gliomstamcellsmodeller, som NCH690 och NCH644, för att undersöka dessa biologiska fenomen.

Forskningen kring NCH640 är starkt inriktad på dess resistensmekanismer, särskilt under hypoxiska förhållanden. Gliomceller som NCH640 visar ett betydande beroende av metaboliska anpassningar, inklusive förändrad reglering av reaktiva syreföreningar (ROS). Studier har visat att man genom att rikta in sig på vägar som den integrerade stressreaktionen (ISR) i NCH640 och relaterade cellinjer kan förbättra deras känslighet för behandlingar som temozolomid, som ofta används vid behandling av glioblastom. Dessa rön är viktiga för att utveckla nya strategier för att övervinna den inneboende resistensen hos gliomstamliknande celler mot standardbehandlingar.

Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Glioblastom

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumörframkallande
Ja

04Identifierare

Källa
NCH690 (Cytion katalognummer 300120)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Tillsätt följande till odlingsmediet: 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natriumselenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hydrokortison
Vidareodling
För subkultur av sfäroidkulturer börjar man med att mekaniskt dissociera sfäroiderna genom att pipettera upp och ner 5-10 gånger med en Eppendorf-pipett med 1000 μl filterspetsar. Centrifugera därefter blandningen vid 300 g i 5 minuter vid rumstemperatur för att pelletera cellerna. Kassera supernatanten och resuspendera cellpelleten i färskt odlingsmedium. Överför slutligen de resuspenderade cellerna till nya odlingskärl för att främja ytterligare sfäroidbildning. Detta tillvägagångssätt säkerställer en effektiv nedbrytning av sfäroiderna och gör dem redo för fortsatt tillväxt i en ny miljö
Såtäthet
1 x 105 celler/ml
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Låt cellerna återhämta sig från frysprocessen i minst 24 till 48 timmar efter upptining.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
78 år
Etnicitet
Kaukasisk