NCH690-celler
Cell line · Produktnummer 300120
Cellinjen NCH640 är en glioblastom-stamcellsliknande cellmodell som används i forskningen för att undersöka mekanismerna bakom tumörresistens, cellöverlevnad under stress...
Anpassning / Rekommendationer
- NCH690-cellerCell line€800.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
NCH640-cellinjen är en glioblastomstamliknande cellmodell som används i forskning för att utforska mekanismerna för tumörresistens, cellöverlevnad under stress och terapeutiska svar. Glioblastom, som är en av de mest aggressiva formerna av hjärntumörer, är svårbehandlad på grund av sin terapiresistens och anpassning till en fientlig mikromiljö. NCH640 odlas i specialiserade medier som Neurobasal A med tillskott som B27, och dess tillväxt stöds av viktiga tillväxtfaktorer som EGF och FGF-2. Den används ofta tillsammans med andra gliomstamcellsmodeller, som NCH690 och NCH644, för att undersöka dessa biologiska fenomen.
Forskningen kring NCH640 är starkt inriktad på dess resistensmekanismer, särskilt under hypoxiska förhållanden. Gliomceller som NCH640 visar ett betydande beroende av metaboliska anpassningar, inklusive förändrad reglering av reaktiva syreföreningar (ROS). Studier har visat att man genom att rikta in sig på vägar som den integrerade stressreaktionen (ISR) i NCH640 och relaterade cellinjer kan förbättra deras känslighet för behandlingar som temozolomid, som ofta används vid behandling av glioblastom. Dessa rön är viktiga för att utveckla nya strategier för att övervinna den inneboende resistensen hos gliomstamliknande celler mot standardbehandlingar.
- Vävnad
- Hjärna
- Sjukdom
- Glioblastom
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Tumörframkallande
- Ja
04Identifierare
- Källa
- NCH690 (Cytion katalognummer 300120)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x915
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Tillsätt följande till odlingsmediet: 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natriumselenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hydrokortison
- Vidareodling
- För subkultur av sfäroidkulturer börjar man med att mekaniskt dissociera sfäroiderna genom att pipettera upp och ner 5-10 gånger med en Eppendorf-pipett med 1000 μl filterspetsar. Centrifugera därefter blandningen vid 300 g i 5 minuter vid rumstemperatur för att pelletera cellerna. Kassera supernatanten och resuspendera cellpelleten i färskt odlingsmedium. Överför slutligen de resuspenderade cellerna till nya odlingskärl för att främja ytterligare sfäroidbildning. Detta tillvägagångssätt säkerställer en effektiv nedbrytning av sfäroiderna och gör dem redo för fortsatt tillväxt i en ny miljö
- Såtäthet
- 1 x 105 celler/ml
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Låt cellerna återhämta sig från frysprocessen i minst 24 till 48 timmar efter upptining.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Donatorns ålder
- 78 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja
.jpg)