İçeriğe atla
NCH690 Hücreleri
Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma

NCH690 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300120

NCH640 hücre hattı, tümör direncinin mekanizmalarını ve stres altında hücresel hayatta kalmayı araştırmak amacıyla araştırmalarda kullanılan glioblastom kök hücre benzeri bir hücre modelidir...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCH640 hücre hattı, tümör direnci mekanizmalarını, stres altında hücresel hayatta kalmayı ve terapötik yanıtları keşfetmek için araştırmalarda kullanılan glioblastoma kök benzeri bir hücre modelidir. Beyin tümörlerinin en agresif formlarından biri olan glioblastomun, tedaviye direnci ve düşmanca bir mikro çevreye adaptasyonu nedeniyle tedavisi zordur. NCH640, B27 gibi takviyelerle Neurobasal A gibi özel ortamlarda kültürlenir ve büyümesi EGF ve FGF-2 gibi temel büyüme faktörleriyle desteklenir. Bu biyolojik olayları araştırmak için genellikle NCH690 ve NCH644 gibi diğer glioma kök hücre modelleriyle birlikte kullanılır.

NCH640 üzerine yapılan araştırmalar, özellikle hipoksik koşullar altında direnç mekanizmalarına odaklanmaktadır. NCH640 gibi glioma hücreleri, değiştirilmiş reaktif oksijen türleri (ROS) düzenlemesi de dahil olmak üzere metabolik adaptasyonlara önemli ölçüde bağımlılık göstermektedir. Çalışmalar, NCH640 ve ilgili hücre hatlarında entegre stres yanıtı (ISR) gibi yolakların hedeflenmesinin, glioblastoma tedavisinde yaygın olarak kullanılan temozolomid gibi tedavilere karşı duyarlılıklarını artırabileceğini göstermiştir. Bu bulgular, glioma kök benzeri hücrelerin standart terapötik müdahalelere karşı doğal direncinin üstesinden gelmek için yeni stratejiler geliştirmek açısından önemlidir.

Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCH690 (Cytion katalog numarası 300120)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insülin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L Na-selenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putresin ve 50 mg/L hidrokortizon ekleyin.
Alt kültür oluşturma
Sferoid kültürleri alt kültüre almak için, 1000 μl filtre uçlu bir Eppendorf pipet kullanarak 5 ila 10 kez aşağı yukarı pipetleme yoluyla sferoidleri mekanik olarak ayırarak başlayın. Bundan sonra, hücreleri peletlemek için karışımı oda sıcaklığında 5 dakika boyunca 300g'de santrifüjleyin. Süpernatantı atın ve hücre peletini taze kültür ortamında yeniden süspanse edin. Son olarak, daha fazla sferoid oluşumunu teşvik etmek için yeniden süspanse edilen hücreleri yeni kültür kaplarına aktarın. Bu yaklaşım etkili sferoid parçalanmasını sağlar ve onları yeni bir ortamda sürekli büyümeye hazırlar
Ekim yoğunluğu
1 x 105 hücre/mL
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra hücrelerin en az 24 ila 48 saat boyunca dondurma işleminden kurtulmasına izin verin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, iyileşmeyi artırmak ve kriyo kaynaklı stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren %50 bazal ortam + %40 FBS + %10 DMSO veya CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
78 yıl
Etnik köken
Kafkas