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Células NCH690
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Glioblastoma

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Células NCH690

Cell line · Número de producto 300120

La línea celular NCH640 es un modelo de células similares a las células madre del glioblastoma que se utiliza en la investigación para estudiar los mecanismos de resistencia tumoral y la supervivencia celular en condiciones de estrés...

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01Información general

Descripción

La línea celular NCH640 es un modelo de célula madre de glioblastoma utilizado en investigación para explorar los mecanismos de resistencia tumoral, supervivencia celular bajo estrés y respuestas terapéuticas. El glioblastoma, una de las formas más agresivas de tumor cerebral, es difícil de tratar debido a su resistencia a la terapia y a su adaptación a un microambiente hostil. El NCH640 se cultiva en medios especializados como Neurobasal A con suplementos como B27, y su crecimiento se ve favorecido por factores de crecimiento esenciales como EGF y FGF-2. A menudo se utiliza junto con otros modelos de células madre de glioma, como NCH690 y NCH644, para investigar estos fenómenos biológicos.

La investigación sobre NCH640 se centra en gran medida en sus mecanismos de resistencia, especialmente en condiciones de hipoxia. Las células de glioma como la NCH640 muestran una dependencia significativa de las adaptaciones metabólicas, incluida la regulación alterada de las especies reactivas del oxígeno (ROS). Diversos estudios han demostrado que el control de vías como la respuesta integrada al estrés (ISR) en NCH640 y otras líneas celulares afines puede mejorar su sensibilidad a terapias como la temozolomida, de uso habitual en el tratamiento del glioblastoma. Estos hallazgos son importantes para diseñar nuevas estrategias que permitan superar la resistencia inherente de las células madre de glioma a las intervenciones terapéuticas habituales.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Glioblastoma

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tumorigénico
Sí

04Identificadores

Referencia
NCH690 (número de catálogo de Cytion 300120)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Añadir al medio 5 mg/L de heparina, 20 ng/mL de bFGF, 20 microgramos/L de EGF, 5 mg/L de insulina, 100 mg/L de transferrina, 5,2 microgramos/L de selenito de sodio, 6,3 microgramos/L de progesterona, 161,1 microgramos/L de putrescina y 50 mg/L de hidrocortisona.
Subcultivo
Para subcultivar los cultivos de esferoides, empiece disociando mecánicamente los esferoides pipeteando arriba y abajo de 5 a 10 veces con una pipeta Eppendorf con puntas de filtro de 1000 μl. A continuación, centrifugar la mezcla a 300 g durante 5 minutos a temperatura ambiente para separar las células. Desechar el sobrenadante y resuspender el sedimento celular en medio de cultivo fresco. Por último, transfiera las células resuspendidas a nuevos recipientes de cultivo para promover la formación de nuevos esferoides. Este método garantiza la descomposición eficaz de los esferoides y los prepara para seguir creciendo en un nuevo entorno
Densidad de siembra
1 x 105 células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Tras la descongelación, deje que las células se recuperen del proceso de congelación durante al menos 24 a 48 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos 50% de medio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
78 años
Origen étnico
Caucásico