Przejdź do treści
Komórki NCH690
Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak wielopostaciowy

Dokumenty

Komórki NCH690

Cell line · Numer produktu 300120

Linia komórkowa NCH640 stanowi model komórek o cechach podobnych do komórek macierzystych glejaka wielopostaciowego, wykorzystywany w badaniach mających na celu zgłębienie mechanizmów oporności nowotworowej oraz przeżywalności komórek w warunkach stresu...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NCH640 to model komórek macierzystych glejaka wykorzystywany w badaniach nad mechanizmami oporności nowotworów, przeżywalności komórek w warunkach stresu i odpowiedzi terapeutycznych. Glejak, jedna z najbardziej agresywnych form nowotworów mózgu, jest trudny do leczenia ze względu na swoją oporność na terapię i adaptację do wrogiego mikrośrodowiska. NCH640 jest hodowany w specjalistycznych pożywkach, takich jak Neurobasal A z dodatkami, takimi jak B27, a jego wzrost jest wspierany przez niezbędne czynniki wzrostu, takie jak EGF i FGF-2. Jest on często wykorzystywany wraz z innymi modelami komórek macierzystych glejaka, takimi jak NCH690 i NCH644, do badania tych zjawisk biologicznych.

Badania nad NCH640 koncentrują się w dużej mierze na jego mechanizmach oporności, szczególnie w warunkach niedotlenienia. Komórki glejaka, takie jak NCH640, wykazują znaczną zależność od adaptacji metabolicznych, w tym zmienionej regulacji reaktywnych form tlenu (ROS). Badania wykazały, że ukierunkowanie szlaków, takich jak zintegrowana odpowiedź na stres (ISR) w NCH640 i pokrewnych liniach komórkowych, może poprawić ich wrażliwość na terapie, takie jak temozolomid, który jest powszechnie stosowany w leczeniu glejaka. Odkrycia te są ważne dla opracowania nowych strategii przezwyciężania wrodzonej oporności komórek macierzystych glejaka na standardowe interwencje terapeutyczne.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak wielopostaciowy

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Tak

04Identyfikatory

Źródło
NCH690 (numer katalogowy Cytion 300120)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki należy dodać 5 mg/l heparyny, 20 ng/ml bFGF, 20 mikrogramów/l EGF, 5 mg/l insuliny, 100 mg/l transferyny, 5,2 mikrograma/l selenitu sodu, 6,3 mikrograma/l progesteronu, 161,1 mikrograma/l putrescyny, 50 mg/l hydrokortyzonu
Hodowla komórek w subkulturze
W przypadku subkulturowania kultur sferoidalnych, należy rozpocząć od mechanicznej dysocjacji sferoidów poprzez pipetowanie w górę i w dół od 5 do 10 razy przy użyciu pipety Eppendorf z końcówkami filtrującymi 1000 μl. Następnie odwirować mieszaninę z prędkością 300 g przez 5 minut w temperaturze pokojowej w celu osuszenia komórek. Odrzucić supernatant i ponownie zawiesić osad komórek w świeżym podłożu hodowlanym. Na koniec przenieś ponownie zawieszone komórki do nowych naczyń hodowlanych, aby promować dalsze tworzenie sferoidów. Takie podejście zapewnia skuteczny rozpad sferoid i przygotowuje je do dalszego wzrostu w nowym środowisku
Gęstość wysiewu
1 x 105 komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy pozwolić komórkom dojść do siebie po procesie zamrażania przez co najmniej 24 do 48 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
78 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski