Skip to content
תאי NCH690
Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה

Documents

תאי NCH690

Cell line · Product number 300120

The NCH640 cell line is a glioblastoma stem-like cell model used in research to explore the mechanisms of tumor resistance, cellular survival under stress...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים NCH640 הוא מודל של תאים דמויי תאי גזע של גליובלסטומה המשמש במחקר לבחינת מנגנוני העמידות של הגידול, הישרדות התאים במצבי לחץ ותגובות טיפוליות. גליובלסטומה, אחד מסוגי הגידולים המוחיים האגרסיביים ביותר, קשה לטיפול בשל עמידותו לטיפול והתאמתו לסביבה מיקרו-סביבתית עוינת. NCH640 מתורבת במדיום ייעודי כגון Neurobasal A עם תוספים כגון B27, וצמיחתו נתמכת על ידי גורמי צמיחה חיוניים כגון EGF ו-FGF-2. הוא משמש לעתים קרובות לצד מודלים אחרים של תאי גזע גליומה, כגון NCH690 ו-NCH644, לחקר תופעות ביולוגיות אלה.

המחקר על NCH640 מתמקד בעיקר במנגנוני העמידות שלו, במיוחד בתנאים היפוקסיים. תאי גליומה כמו NCH640 מראים תלות משמעותית בהסתגלויות מטבוליות, כולל ויסות משונה של מינים תגובתיים של חמצן (ROS). מחקרים הוכיחו כי מיקוד במסלולים כגון תגובת הלחץ המשולבת (ISR) ב-NCH640 ובקווי תאים קשורים עשוי לשפר את רגישותם לטיפולים כגון טמוזולומיד, הנמצא בשימוש נפוץ בטיפול בגליובלסטומה. ממצאים אלה חשובים לפיתוח אסטרטגיות חדשות להתגברות על העמידות המובנית של תאי גזע דמויי גליומה להתערבויות טיפוליות סטנדרטיות.

Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
כן

04Identifiers

Citation
NCH690 (מספר קטלוגי Cytion 300120)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
יש להוסיף למדיום 5 מ"ג/ל' הפרין, 20 ננוגרם/מ"ל bFGF, 20 מיקרוגרם/ל' EGF, 5 מ"ג/ליטר אינסולין, 100 מ"ג/ליטר טרנספרין, 5.2 מיקרוגרם/ליטר נתרן-סלניט, 6.3 מיקרוגרם/ליטר פרוגסטרון, 161.1 מיקרוגרם/ליטר פוטrescין, 50 מ"ג/ליטר הידרוקורטיזון
Subculturing
לצורך תרבית משנה של תרבויות כדוריות, יש להתחיל בפירוק מכני של הכדוריות באמצעות פיפטה Eppendorf עם קצות מסנן של 1000 μl, על ידי שאיבה כלפי מעלה ומטה 5 עד 10 פעמים. לאחר מכן, יש לסובב את התערובת בצנטריפוגה ב-300g למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר כדי להפריד את התאים. יש לשפוך את הנוזל העליון ולהחזיר את תאי התרבות למדיום תרבית טרי. לבסוף, העבירו את התאים המושעים מחדש לכלי תרבית חדשים כדי לקדם היווצרות נוספת של ספרואידים. גישה זו מבטיחה פירוק יעיל של הספרואידים ומכינה אותם להמשך צמיחה בסביבה חדשה
Seeding density
1 x 105 תאים/מ"ל
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, יש לאפשר לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה למשך 24 עד 48 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
78 שנים
Ethnicity
קווקזי