Preskoči na vsebino
Celice NCH690
Tkivo
Možgani
Bolezen
Glioblastom

Dokumenti

Celice NCH690

Cell line · Številka izdelka 300120

Celična linija NCH640 je model celic, podobnih glioblastomskim matičnim celicam, ki se v raziskavah uporablja za preučevanje mehanizmov odpornosti tumorja, preživetja celic v stresnih razmerah...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija NCH640 je model matičnih celic, podoben glioblastomu, ki se uporablja v raziskavah za raziskovanje mehanizmov odpornosti tumorjev, preživetja celic pod stresom in terapevtskih odzivov. Glioblastom, eno najbolj agresivnih oblik možganskih tumorjev, je težko zdraviti zaradi odpornosti na zdravljenje in prilagajanja na sovražno mikrookolje. NCH640 se goji v specializiranih medijih, kot je Neurobasal A z dodatki, kot je B27, njegovo rast pa podpirajo bistveni rastni dejavniki, kot sta EGF in FGF-2. Za raziskovanje teh bioloških pojavov se pogosto uporablja skupaj z drugimi modeli gliomskih matičnih celic, kot sta NCH690 in NCH644.

Raziskave o NCH640 se močno osredotočajo na mehanizme odpornosti, zlasti v hipoksičnih pogojih. Gliomske celice, kot je NCH640, kažejo veliko odvisnost od presnovnih prilagoditev, vključno s spremenjeno regulacijo reaktivnih kisikovih vrst (ROS). Študije so pokazale, da lahko usmerjanje poti, kot je integrirani odziv na stres (ISR), v NCH640 in sorodnih celičnih linijah izboljša njihovo občutljivost na terapije, kot je temozolomid, ki se pogosto uporablja pri zdravljenju glioblastoma. Te ugotovitve so pomembne za oblikovanje novih strategij za premagovanje inherentne odpornosti gliomskih matičnih celic na standardne terapevtske posege.

Tkivo
Možgani
Bolezen
Glioblastom

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCH690 (kataloška številka Cytion 300120)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilnemu mediju dodajte 5 mg/L heparina, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogramov/L EGF, 5 mg/L insulina, 100 mg/L transferina, 5,2 mikrograma/L natrijevega selenita, 6,3 mikrograma/L progesterona, 161,1 mikrograma/L putrescina in 50 mg/L hidrokortizona
Preusmeritev v drugo kulturo
Pri subkultiviranju sferoidnih kultur začnite z mehansko disociacijo sferoidov s pipetiranjem gor in dol 5 do 10-krat z uporabo Eppendorfove pipete s 1000 μl filtrirnimi konicami. Nato mešanico centrifugirajte pri 300 g 5 minut pri sobni temperaturi, da se celice izločijo. Zavrzite supernatant in ponovno suspendirajte celično peleto v svežem gojišču. Resuspendirane celice prenesite v nove posode za gojenje, da spodbudite nadaljnjo tvorbo sferoidov. Ta pristop zagotavlja učinkovito razgradnjo sferoidov in jih pripravi za nadaljnjo rast v novem okolju
Gostota setve
1 x 105 celic/ml
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi pustite celice, da si opomorejo od postopka zamrzovanja vsaj 24 do 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
78 let
Etnična pripadnost
Kavkaški