Gå til innholdet
NCH690-celler
Vev
Hjerne
Sykdom
Glioblastom

Dokumenter

NCH690-celler

Cell line · Produktnummer 300120

NCH640-cellelinjen er en glioblastom-stamcellelignende modell som brukes i forskning for å undersøke mekanismene bak tumorresistens, cellenes overlevelse under stress...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NCH640-cellelinjen er en glioblastom-stamcellelignende modell som brukes i forskning for å utforske mekanismene bak tumorresistens, cellulær overlevelse under stress og terapeutisk respons. Glioblastom, en av de mest aggressive formene for hjernesvulst, er vanskelig å behandle på grunn av sin resistens mot behandling og tilpasning til et fiendtlig mikromiljø. NCH640 dyrkes i spesialiserte medier som Neurobasal A med tilskudd som B27, og veksten støttes av essensielle vekstfaktorer som EGF og FGF-2. Den brukes ofte sammen med andre gliomstamcellemodeller, som NCH690 og NCH644, for å undersøke disse biologiske fenomenene.

Forskningen på NCH640 fokuserer i stor grad på dens resistensmekanismer, særlig under hypoksiske forhold. Gliomceller som NCH640 er i stor grad avhengige av metabolske tilpasninger, inkludert endret regulering av reaktive oksygenarter (ROS). Studier har vist at ved å påvirke signalveier som den integrerte stressresponsen (ISR) i NCH640 og beslektede cellelinjer, kan cellene bli mer følsomme for behandlinger som temozolomid, som ofte brukes i behandling av glioblastom. Disse funnene er viktige for å utvikle nye strategier for å overvinne gliomstamcellelignende cellers iboende resistens mot standardbehandlinger.

Vev
Hjerne
Sykdom
Glioblastom

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumorinduserende
Ja

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCH690 (Cytion-katalognummer 300120)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natriumselenitt, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hydrokortison
Subkultivering
For subkulturer av sfæroidkulturer begynner du med å dissosiere sfæroidene mekanisk ved å pipettere opp og ned 5 til 10 ganger med en Eppendorf-pipette med 1000 μl filterspisser. Deretter sentrifugeres blandingen ved 300 g i 5 minutter ved romtemperatur for å pelletere cellene. Kast supernatanten, og resuspender cellepelleten i nytt dyrkingsmedium. Overfør til slutt de resuspenderte cellene til nye dyrkningsbeholdere for å fremme ytterligere sfæroiddannelse. Denne fremgangsmåten sikrer effektiv nedbrytning av sfæroidene og gjør dem klare for fortsatt vekst i et nytt miljø
Såtetthet
1 x 105 celler/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining skal cellene få komme seg etter fryseprosessen i minst 24 til 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
78 år
Etnisitet
Kaukasisk