Skip to content
Tế bào NCH690
Tissue
Não
Disease
U não đa hình

Documents

Tế bào NCH690

Cell line · Product number 300120

The NCH640 cell line is a glioblastoma stem-like cell model used in research to explore the mechanisms of tumor resistance, cellular survival under stress...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào NCH640 là mô hình tế bào gốc giống glioblastoma được sử dụng trong nghiên cứu để khám phá các cơ chế kháng thuốc của khối u, sự sống còn của tế bào dưới áp lực và phản ứng điều trị. Glioblastoma, một trong những dạng u não ác tính nhất, khó điều trị do khả năng kháng thuốc và thích nghi với môi trường vi mô khắc nghiệt. NCH640 được nuôi cấy trong môi trường chuyên biệt như Neurobasal A với các chất bổ sung như B27, và sự phát triển của nó được hỗ trợ bởi các yếu tố tăng trưởng thiết yếu như EGF và FGF-2. Nó thường được sử dụng cùng với các mô hình tế bào gốc glioma khác, như NCH690 và NCH644, để nghiên cứu các hiện tượng sinh học này.

Nghiên cứu về NCH640 tập trung mạnh vào các cơ chế kháng thuốc của nó, đặc biệt trong điều kiện thiếu oxy. Các tế bào glioma như NCH640 phụ thuộc đáng kể vào các thích nghi chuyển hóa, bao gồm sự điều hòa bất thường của các loài oxy phản ứng (ROS). Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc nhắm mục tiêu vào các con đường như phản ứng stress tích hợp (ISR) trong NCH640 và các dòng tế bào liên quan có thể cải thiện độ nhạy cảm của chúng đối với các liệu pháp như temozolomide, thường được sử dụng trong điều trị u não đa hình. Những phát hiện này rất quan trọng trong việc phát triển các chiến lược mới để vượt qua sự kháng thuốc bẩm sinh của các tế bào gốc u não đối với các can thiệp điều trị tiêu chuẩn.

Tissue
Não
Disease
U não đa hình

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
Có

04Identifiers

Citation
NCH690 (Số catalog Cytion 300120)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_x915

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 5 mg/L Heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 microgram/L EGF, 5 mg/L Insulin, 100 mg/L Transferrin, 5,2 microgram/L Na-selenit, 6,3 microgram/L Progesteron, 161,1 microgram/L Putrescin, 50 mg/L Hydrocortison
Subculturing
Để nuôi cấy lại các khối cầu, bắt đầu bằng cách tách rời các khối cầu một cách cơ học bằng cách hút lên và xuống 5 đến 10 lần bằng ống hút Eppendorf có đầu lọc 1000 μl. Sau đó, ly tâm hỗn hợp ở 300g trong 5 phút ở nhiệt độ phòng để tạo thành cặn tế bào. Loại bỏ dịch siêu âm và tái phân tán cặn tế bào trong môi trường nuôi cấy tươi. Cuối cùng, chuyển các tế bào đã tái phân tán vào các bình nuôi cấy mới để thúc đẩy quá trình hình thành khối cầu tiếp theo. Phương pháp này đảm bảo việc phân giải khối cầu hiệu quả và chuẩn bị cho chúng tiếp tục phát triển trong môi trường mới
Seeding density
1 x 10⁵ tế bào/mL
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, hãy để các tế bào phục hồi từ quá trình đông lạnh trong ít nhất 24 đến 48 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng hỗn hợp 50% môi trường cơ bản + 40% huyết thanh bò phôi (FBS) + 10% DMSO, hoặc CM-1 (số catalog Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện khả năng phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
78 năm
Ethnicity
Người da trắng