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NCH690細胞
ティッシュ
脳
病気
膠芽腫

NCH690細胞

Cell line · 製品番号 300120

NCH640細胞株は、腫瘍の耐性メカニズムやストレス下での細胞生存などを解明するための研究に使用される、膠芽腫幹細胞様モデルである……

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01概要

説明

NCH640細胞株は膠芽腫幹細胞様モデルで、腫瘍抵抗性、ストレス下での細胞生存、治療反応のメカニズムを探る研究に用いられている。膠芽腫は脳腫瘍の中で最も侵攻性の高いものの一つであり、治療に対する抵抗性と敵対的な微小環境への適応のために治療が困難である。NCH640はNeurobasal Aのような特殊な培地とB27のようなサプリメントで培養され、EGFやFGF-2のような必須増殖因子によって増殖がサポートされる。NCH640は、NCH690やNCH644のような他の神経膠腫幹細胞モデルとともに、これらの生物学的現象を調べるためにしばしば使用される。

NCH640の研究は、特に低酸素条件下での耐性メカニズムに重点を置いている。NCH640のような神経膠腫細胞は、変化した活性酸素種(ROS)制御を含む代謝適応に大きく依存している。研究により、NCH640および関連細胞株における統合ストレス応答(ISR)などの経路を標的とすることで、膠芽腫治療で一般的に使用されるテモゾロミドのような治療薬に対する感受性が改善される可能性が示された。これらの知見は、標準的な治療介入に対する神経膠腫幹様細胞固有の抵抗性を克服する新たな戦略を考案する上で重要である。

ティッシュ
脳
病気
膠芽腫

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

腫瘍形成性
はい

04識別子

引用
NCH690 (Cytion カタログ番号 300120)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_x915

05取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に、5 mg/Lのヘパリン、20 ng/mLのbFGF、20マイクログラム/LのEGF、 5 mg/Lのインスリン、100 mg/Lのトランスフェリン、5.2マイクログラム/LのNa-セレン酸塩、6.3マイクログラム/Lのプロゲステロン、161.1マイクログラム/Lのプトレシン、50 mg/Lのヒドロコルチゾンを添加する。
継代培養
スフェロイド培養を再培養する場合は、まず、1000μlのフィルターチップ付きエッペンドルフ・ピペットを用いて、上下に5~10回ピペッティングし、スフェロイドを機械的に解離させる。この後、混合物を300g、室温で5分間遠心し、細胞をペレット化する。上清を捨て、細胞ペレットを新しい培地に懸濁する。最後に、再懸濁した細胞を新しい培養容器に移し、スフェロイド形成をさらに促進する。このアプローチは、スフェロイドの効率的な分解を確実にし、新しい環境での継続的な増殖に備える。
播種密度
1 × 10⁵ 細胞/mL
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を少なくとも24~48時間、凍結から回復させる。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、50%基礎培地+40%FBS+10%DMSO、またはCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。この培地には、回復を促進し、凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤が含まれている。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
78年
民族
白人