NCI-H1048

La lignée cellulaire NCI-H1048 est une lignée de carcinome pulmonaire à petites cellules (CPPC) humain dérivée d’une tumeur pulmonaire chez un patient adulte; elle est largement utilisée comme modèle de cancer du poumon neuroendocrinien. Le carcinome pulmonaire à petites cellules se caractérise par une croissance rapide, une dissémination métastatique précoce et un lien étroit avec la différenciation neuroendocrine; la lignée NCI-H1048 reflète bon nombre de ces caractéristiques. Les cellules se développent généralement en suspension ou sous forme d’amas faiblement adhérents et présentent une morphologie compatible avec celle du CPPC, notamment de petites cellules rondes présentant un rapport nucléaire/cytoplasmique élevé.

Au niveau moléculaire, la lignée NCI-H1048 présente des caractéristiques propres au carcinome pulmonaire à petites cellules, notamment des altérations des voies clés de suppression tumorale telles que TP53 et RB1, qui sont couramment inactivées dans cette maladie. Cette lignée cellulaire exprime des marqueurs neuroendocriniens, notamment des protéines associées à la sécrétion d’hormones et à la différenciation neuronale, ce qui en fait un modèle pertinent pour l’étude de la signalisation neuroendocrinienne et de la biologie tumorale. À l’instar d’autres modèles de CPPC, elle peut également présenter une amplification ou une surexpression de gènes oncogènes impliqués dans la prolifération et la survie, contribuant ainsi à son phénotype agressif.

La lignée NCI-H1048 est utilisée dans la recherche axée sur la pathogenèse du cancer du poumon à petites cellules, la sensibilité aux médicaments et les mécanismes de résistance. Elle est particulièrement utile pour évaluer les agents chimiothérapeutiques et les thérapies ciblées dans le contexte d’une maladie connue pour sa réactivité initiale au traitement suivie d’une rechute rapide. Cette lignée cellulaire est également utilisée dans des études portant sur la plasticité des cellules tumorales, la différenciation neuroendocrine et le criblage de médicaments à haut débit. Toutefois, comme c’est le cas pour de nombreux modèles de CPPC, les profils détaillés spécifiques aux mutations peuvent varier d’un ensemble de données à l’autre, et une caractérisation moléculaire supplémentaire est recommandée pour les expériences nécessitant des renseignements génomiques précis.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.