NCI-H1048

A NCI-H1048 é uma linha celular de carcinoma pulmonar de pequenas células (SCLC) humano, derivada de um tumor pulmonar de um doente adulto, sendo amplamente utilizada como modelo de cancro pulmonar neuroendócrino. O carcinoma pulmonar de pequenas células caracteriza-se pelo crescimento rápido, disseminação metastática precoce e forte associação com a diferenciação neuroendócrina, e a NCI-H1048 reflete muitas destas características. As células crescem tipicamente em suspensão ou como aglomerados pouco aderentes e apresentam uma morfologia consistente com o SCLC, incluindo células pequenas e redondas com elevadas relações núcleo-citoplasma.

A nível molecular, a NCI-H1048 exibe características típicas do SCLC, incluindo alterações em vias-chave de supressão tumoral, como TP53 e RB1, que são frequentemente inativadas nesta doença. A linha celular expressa marcadores neuroendócrinos, incluindo proteínas associadas à secreção hormonal e à diferenciação neuronal, tornando-a um modelo relevante para o estudo da sinalização neuroendócrina e da biologia tumoral. Tal como outros modelos de SCLC, pode também apresentar amplificação ou sobreexpressão de fatores oncogénicos envolvidos na proliferação e sobrevivência, contribuindo para o seu fenótipo agressivo.

A NCI-H1048 é utilizada em investigação centrada na patogénese do cancro do pulmão de pequenas células, na sensibilidade aos fármacos e nos mecanismos de resistência. É particularmente valiosa para avaliar agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas num contexto de doença conhecido pela resposta inicial ao tratamento seguida de rápida recidiva. A linha celular é também utilizada em estudos sobre a plasticidade das células tumorais, a diferenciação neuroendócrina e o rastreio de fármacos de alto rendimento. No entanto, tal como acontece com muitos modelos de SCLC, os perfis detalhados específicos de mutações podem variar entre conjuntos de dados, sendo recomendada uma caracterização molecular adicional para experiências que exijam informação genómica precisa.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia