Preskoči na vsebino
NCI-H1048
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
H1048, H-1048, NCIH1048

Dokumenti

NCI-H1048

Cell line · Številka izdelka 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

NCI-H1048 je celična linija človeškega pljučnega karcinoma z majhnimi celicami (SCLC), pridobljena iz pljučnega tumorja pri odraslem bolniku, ki se pogosto uporablja kot model nevroendokrinega pljučnega raka. Maličnokletni pljučni karcinom je značilen po hitri rasti, zgodnjem metastaziranju in močni povezanosti z nevroendokrino diferenciacijo, NCI-H1048 pa odraža mnoge od teh značilnosti. Celice običajno rastejo v suspenziji ali kot ohlapno adhezivne skupke in kažejo morfologijo, skladno z SCLC, vključno z majhnimi, okroglimi celicami z visokim razmerjem med jedrom in citoplazmo.

Na molekularni ravni NCI-H1048 kaže značilnosti, značilne za SCLC, vključno s spremembami v ključnih poteh tumorjevih supresorjev, kot sta TP53 in RB1, ki so pri tej bolezni pogosto inaktivirani. Celična linija izraža nevroendokrine markerje, vključno s proteini, povezanimi s sekrecijo hormonov in nevronsko diferenciacijo, kar jo naredi za relevanten model za preučevanje nevroendokrinega signaliziranja in tumorjeve biologije. Podobno kot drugi modeli SCLC lahko tudi ta kaže amplifikacijo ali prekomerno izražanje onkogenih dejavnikov, vpletenih v proliferacijo in preživetje, kar prispeva k njenemu agresivnemu fenotipu.

NCI-H1048 se uporablja v raziskavah, osredotočenih na patogenezo pljučnega raka z majhnimi celicami, občutljivost na zdravila in mehanizme odpornosti. Zlasti je dragocena za ocenjevanje kemoterapevtskih sredstev in ciljnih terapij v okviru bolezni, znane po začetnem odzivu na zdravljenje, ki mu sledi hiter ponovni izbruh. Celična linija se uporablja tudi v študijah plastičnosti tumorskih celic, nevroendokrine diferenciacije in presejanja zdravil z visoko zmogljivostjo. Vendar pa se, kot pri mnogih modelih SCLC, podrobni profili, specifični za mutacije, lahko razlikujejo med podatkovnimi nizi, zato se za poskuse, ki zahtevajo natančne genom

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Stanje MSI
Nestabilen (visoka vrednost MSI)

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H1048 (kataloška številka Cytion 305595)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite s 5 % FBS, 0,005 mg/ml inzulina, 0,01 mg/ml transferina, 30 nM natrijevega selenita, 10 nM hidrokortizona, 10 nM betaestradiola
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
53 let
Etnična pripadnost
Afroameričan