Mine otse sisu juurde
NCI-H1048
Kude
Kopsud
Haigus
Väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
H1048, H-1048, NCIH1048

Dokumendid

NCI-H1048

Cell line · Toote number 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H1048 on inimese väikerakk-kopsuvähi (SCLC) rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendi kopsukasvajast ja mida kasutatakse laialdaselt neuroendokriinse kopsuvähi mudelina. Väikerakk-kopsuvähile on iseloomulik kiire kasv, varajane metastaaside levik ja tugev seos neuroendokriinse diferentseerumisega, ning NCI-H1048 peegeldab paljusid neist tunnustest. Rakud kasvavad tavaliselt suspensioonis või lõdvalt kokku kleepunud klastritena ning nende morfoloogia vastab SCLC-le, sealhulgas väikesed, ümmargused rakud, millel on kõrge tuuma-tsütoplasma suhe.

Molekulaarsel tasandil näitab NCI-H1048 väikerakk-kopsuvähile iseloomulikke tunnuseid, sealhulgas muutusi peamistes kasvajavastastes signaalradades, nagu TP53 ja RB1, mis on selle haiguse puhul tavaliselt inaktiveeritud. Rakuliin ekspresseerib neuroendokriinseid markereid, sealhulgas hormoonide sekretsiooni ja neuronite diferentseerumisega seotud valke, mis teeb sellest asjakohase mudeli neuroendokriinse signalisatsiooni ja kasvajabioloogia uurimiseks. Nagu teisedki SCLC-mudelid, võib ka see näidata proliferatsiooni ja ellujäämisega seotud onkogeensete tegurite amplifikatsiooni või üliekspressiooni, mis aitab kaasa selle agressiivsele fenotüübile.

NCI-H1048 kasutatakse väikerakk-kopsuvähi patogeneesi, ravimite tundlikkuse ja resistentsusmehhanismide uurimisel. See on eriti väärtuslik kemoteraapiapreparaatide ja sihtterapiate hindamisel haiguse kontekstis, mis on tuntud esialgse ravivastuse ja sellele järgneva kiire retsidiivi poolest. Rakuliini kasutatakse ka kasvajarakkude plastilisuse, neuroendokriinse diferentseerumise ja suure läbilaskevõimega ravimite sõelumise uuringutes. Nagu paljude SCLC-mudelite puhul, võivad üksikasjalikud mutatsioonispetsiifilised profiilid andmekogumite vahel erineda ning täpset genoomiinformatsiooni nõudvate katsete puhul soovitatakse täiendavat molekulaarset iseloomustamist.

Kude
Kopsud
Haigus
Väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
MSI staatus
Ebastabiilne (MSI kõrge)

04Tunnused

Viide
NCI-H1048 (Cytioni katalooginumber 305595)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse keskkonda 5% FBS, 0,005 mg/ml insuliini, 0,01 mg/ml transferriini, 30nM naatriumseleniidi, 10 nM hüdrokortisooni, 10 nM beeta-östradiooliga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Afroameeriklane