NCI-H1048

Az NCI-H1048 egy felnőtt beteg tüdődaganatából nyert humán kissejtes tüdőrák (SCLC) sejtvonal, amelyet széles körben használnak a neuroendokrin tüdőrák modelljeként. A kis sejtes tüdőrákot gyors növekedés, korai metasztatikus terjedés és a neuroendokrin differenciálódással való szoros összefüggés jellemzi, és az NCI-H1048 ezeknek a jellemzőknek a nagy részét tükrözi. A sejtek jellemzően szuszpenzióban vagy lazán tapadó klaszterekben növekednek, és az SCLC-vel összhangban lévő morfológiát mutatnak, beleértve a kis, kerek sejteket, amelyeknél a mag-citoplazma arány magas.

Molekuláris szinten az NCI-H1048 a SCLC-re jellemző tulajdonságokat mutat, beleértve a kulcsfontosságú tumor szuppresszor útvonalak, például a TP53 és az RB1 változásait, amelyek ebben a betegségben általában inaktiválódnak. A sejtvonal neuroendokrin markereket fejez ki, beleértve a hormon szekrécióval és az idegsejt-differenciálódással kapcsolatos fehérjéket, ami releváns modellé teszi a neuroendokrin jelátvitel és a tumorbiológia tanulmányozásához. Más SCLC-modellekhez hasonlóan ez is mutathatja a proliferációban és a túlélésben részt vevő onkogén hajtóerők amplifikációját vagy túltermelését, hozzájárulva agresszív fenotípusához.

Az NCI-H1048-at a kissejtes tüdőrák patogenezisére, gyógyszerérzékenységére és rezisztenciamechanizmusaira összpontosító kutatásokban használják. Különösen értékes a kemoterápiás szerek és a célzott terápiák értékelésében olyan betegségkontextusban, amelyről ismert, hogy a kezdeti kezelésre reagál, de gyorsan visszaesik. A sejtvonalat tumorsejt-plaszticitás, neuroendokrin differenciálódás és nagy áteresztőképességű gyógyszerszűrés vizsgálataiban is használják. Ugyanakkor, mint sok más SCLC-modell esetében, a részletes mutáció-specifikus profilok az adatkészletek között eltérhetnek, ezért pontos genomikus információt igénylő kísérletekhez további molekuláris jellemzés ajánlott.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban