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NCI-H1048
Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a piccole cellule
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
H1048, H-1048, NCIH1048

Documenti

NCI-H1048

Cell line · Codice prodotto 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

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01Informazioni generali

Descrizione

NCI-H1048 è una linea cellulare di carcinoma polmonare a piccole cellule (SCLC) umano derivata da un tumore polmonare in un paziente adulto ed è ampiamente utilizzata come modello di carcinoma polmonare neuroendocrino. Il carcinoma polmonare a piccole cellule è caratterizzato da una crescita rapida, una diffusione metastatica precoce e una forte associazione con la differenziazione neuroendocrina, e NCI-H1048 riflette molte di queste caratteristiche. Le cellule crescono tipicamente in sospensione o come gruppi debolmente aderenti e mostrano una morfologia coerente con l'SCLC, comprese cellule piccole e rotonde con elevati rapporti nucleo-citoplasma.

A livello molecolare, NCI-H1048 presenta caratteristiche tipiche del SCLC, tra cui alterazioni nelle principali vie dei geni oncosoppressori come TP53 e RB1, che sono comunemente inattivate in questa malattia. La linea cellulare esprime marcatori neuroendocrini, tra cui proteine associate alla secrezione ormonale e alla differenziazione neuronale, rendendola un modello rilevante per lo studio della segnalazione neuroendocrina e della biologia tumorale. Come altri modelli di SCLC, può anche mostrare amplificazione o sovraespressione di driver oncogenici coinvolti nella proliferazione e nella sopravvivenza, contribuendo al suo fenotipo aggressivo.

NCI-H1048 è utilizzata nella ricerca incentrata sulla patogenesi del carcinoma polmonare a piccole cellule, sulla sensibilità ai farmaci e sui meccanismi di resistenza. È particolarmente utile per la valutazione di agenti chemioterapici e terapie mirate in un contesto patologico noto per la risposta iniziale al trattamento seguita da una rapida recidiva. La linea cellulare viene utilizzata anche in studi sulla plasticità delle cellule tumorali, sulla differenziazione neuroendocrina e sullo screening farmacologico ad alta produttività. Tuttavia, come per molti modelli di SCLC, i profili dettagliati specifici per mutazione possono variare tra i diversi set di dati, e si raccomanda un'ulteriore caratterizzazione molecolare per gli esperimenti che richiedono informazioni genomiche precise.

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a piccole cellule
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Stato MSI
Instabile (MSI alto)

04Identificatori

Riferimento bibliografico
NCI-H1048 (catalogo Cytion numero 305595)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 5% FBS, 0,005 mg/mL di insulina, 0,01 mg/mL di transferrina, 30nM di selenito di sodio, 10 nM di idrocortisone, 10 nM di beta-estradiolo
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con TrypLE Express, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
53 anni
Etnia
Afroamericano