Skip to content
NCI-H1048
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งชนิดเซลล์เล็ก
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
H1048, H-1048, NCIH1048

Documents

NCI-H1048

Cell line · Product number 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H1048 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก (SCLC) ของมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้องอกในปอดของผู้ป่วยผู้ใหญ่ และถูกใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองของมะเร็งปอดชนิดเนื้องอกประสาทต่อมไร้ท่อ มะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็กมีลักษณะเด่นคือการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็ว การแพร่กระจายไปยังอวัยวะอื่นตั้งแต่ระยะเริ่มต้น และความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาทและต่อมไร้ท่อ โดย NCI-H1048 สะท้อนลักษณะหลายประการเหล่านี้ เซลล์มักเจริญเติบโตในลักษณะแขวนลอยหรือเป็นกลุ่มที่เกาะกันหลวมๆ และมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่สอดคล้องกับ SCLC รวมถึงเซลล์ขนาดเล็ก กลม มีอัตราส่วนระหว่างขนาดนิวเคลียสต่อไซโตพลาซึมสูง

ในระดับโมเลกุล NCI-H1048 แสดงลักษณะเฉพาะของ SCLC รวมถึงการเปลี่ยนแปลงในเส้นทางยับยั้งเนื้องอกที่สำคัญ เช่น TP53 และ RB1 ซึ่งมักถูกทำให้ไม่ทำงานในโรคนี้ สายเซลล์นี้แสดงออกของตัวบ่งชี้เนื้องอกประสาทต่อมไร้ท่อ รวมถึงโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการหลั่งฮอร์โมนและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาท ทำให้เป็นแบบจำลองที่เกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาการส่งสัญญาณประสาทต่อมไร้ท่อและชีววิทยาของเนื้องอก เช่นเดียวกับแบบจำลอง SCLC อื่น ๆ อาจแสดงการเพิ่มจำนวนหรือการแสดงออกมากเกินไปของตัวกระตุ้นมะเร็งที่เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดของเซลล์ ซึ่งส่งผลต่อลักษณะที่ก้าวร้าวของมัน

NCI-H1048 ถูกใช้ในการวิจัยที่มุ่งเน้นไปที่พยาธิกำเนิดของมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก ความไวต่อยา และกลไกการดื้อยา มีคุณค่าอย่างยิ่งในการประเมินยาเคมีบำบัดและการรักษาแบบมุ่งเป้าในบริบทของโรคที่ทราบการตอบสนองต่อการรักษาเบื้องต้นอย่างรวดเร็วตามด้วยการกลับเป็นซ้ำอย่างรวดเร็ว เซลล์ไลน์นี้ยังถูกใช้ในการศึกษาความยืดหยุ่นของเซลล์มะเร็ง การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาทต่อต่อมไร้ท่อ และการคัดกรองยาแบบความจุสูง อย่างไรก็ตาม เช่นเดียวกับโมเดล SCLC หลายแบบ โปรไฟล์การกลายพันธุ์เฉพาะอาจแตกต่างกันระหว่างชุดข้อมูล และแนะนำให้มีการวิเคราะห์ทางโมเลกุลเพิ่มเติมสำหรับการทดลองที่ต้องการข้อมูลทางพันธุกรรมที่แม่นยำ

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งชนิดเซลล์เล็ก
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
MSI status
ไม่เสถียร (MSI สูง)

04Identifiers

Citation
NCI-H1048 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305595)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 5%, อินซูลิน 0.005 มก./มล., ทรานส์เฟอร์ริน 0.01 มก./มล., โซเดียมซีลีไนต์ 30 นาโนโมลาร์, ไฮโดรคอร์ติโซน 10 นาโนโมลาร์, และเบต้า-เอสตราไดออล 10 นาโนโมลาร์
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย TrypLE Express โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (g) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
53 ปี
Ethnicity
แอฟริกันอเมริกัน