Gå direkte til indholdet
NCI-H1048
Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet karcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
H1048, H-1048, NCIH1048

Dokumenter

NCI-H1048

Cell line · Varenummer 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCI-H1048 er en human cellelinje for småcellet lungekræft (SCLC), der stammer fra en lungetumor hos en voksen patient, og den anvendes i vid udstrækning som model for neuroendokrin lungekræft. Småcellet lungekræft er kendetegnet ved hurtig vækst, tidlig spredning af metastaser og en stærk sammenhæng med neuroendokrin differentiering, og NCI-H1048 afspejler mange af disse træk. Cellerne vokser typisk i suspension eller som løst sammenhængende klynger og udviser en morfologi, der er i overensstemmelse med SCLC, herunder små, runde celler med høje forhold mellem kerne og cytoplasma.

På molekylært niveau udviser NCI-H1048 træk, der er karakteristiske for SCLC, herunder ændringer i vigtige tumorsuppressorveje såsom TP53 og RB1, som ofte inaktiveres ved denne sygdom. Cellelinjen udtrykker neuroendokrine markører, herunder proteiner forbundet med hormonudskillelse og neuronal differentiering, hvilket gør den til en relevant model til undersøgelse af neuroendokrin signalering og tumorbiologi. Ligesom andre SCLC-modeller kan den også udvise amplifikation eller overekspression af onkogene drivere involveret i proliferation og overlevelse, hvilket bidrager til dens aggressive fænotype.

NCI-H1048 anvendes i forskning med fokus på patogenesen af småcellet lungekræft, lægemiddelfølsomhed og resistensmekanismer. Den er særligt værdifuld til evaluering af kemoterapeutiske midler og målrettede terapier i en sygdomssammenhæng, der er kendt for indledende respons på behandlingen efterfulgt af hurtigt tilbagefald. Cellelinjen anvendes også i studier af tumorcellers plasticitet, neuroendokrin differentiering og højkapacitets-lægemiddelscreening. Som med mange SCLC-modeller kan detaljerede mutationsspecifikke profiler dog variere mellem datasæt, og yderligere molekylær karakterisering anbefales til eksperimenter, der kræver præcis genomisk information.

Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet karcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
MSI-status
Ustabil (MSI høj)

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H1048 (Cytion katalognummer 305595)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilfør mediet 5 % FBS, 0,005 mg/ml insulin, 0,01 mg/ml transferrin, 30 nM natriumselenit, 10 nM hydrokortison, 10 nM beta-østradiol
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
53 år
Etnisk tilhørsforhold
Afroamerikaner