NCI-H1048

NCI-H1048 ir cilvēka mazšūnu plaušu karcinomas (SCLC) šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušā pacienta plaušu audzēja, un to plaši izmanto kā neiroendokrīnā plaušu vēža modeli. Mazšūnu plaušu karcinomai raksturīga strauja augšana, agrīna metastāžu izplatība un cieša saistība ar neiroendokrīno diferenciāciju, un NCI-H1048 atspoguļo daudzas no šīm pazīmēm. Šīs šūnas parasti aug suspensijā vai kā vāji saistīti kopumi un to morfoloģija atbilst SCLC, tostarp tās ir mazas, apaļas šūnas ar augstu kodola un citoplazmas attiecību.

Molekulārajā līmenī NCI-H1048 izrāda SCLC raksturīgas pazīmes, tostarp izmaiņas galvenajos audzēja supresoru ceļos, piemēram, TP53 un RB1, kas šajā slimībā parasti ir inaktivēti. Šī šūnu līnija ekspresē neiroendokrīnos marķierus, tostarp proteīnus, kas saistīti ar hormonu sekrēciju un neironu diferenciāciju, padarot to par atbilstošu modeli neiroendokrīno signālu pārraides un audzēja bioloģijas pētīšanai. Tāpat kā citi SCLC modeļi, arī šis var izrādīt proliferācijā un izdzīvošanā iesaistīto onkogēno faktoru amplifikāciju vai pārmērīgu ekspresiju, kas veicina tā agresīvo fenotipu.

NCI-H1048 tiek izmantota pētījumos, kas vērsti uz mazšūnu plaušu vēža patogēnēzi, jutību pret zālēm un rezistences mehānismiem. Tā ir īpaši vērtīga, lai novērtētu ķīmijterapijas līdzekļus un mērķtiecīgas terapijas slimības kontekstā, kas pazīstams ar sākotnēju atbildes reakciju uz ārstēšanu, kam seko ātra recidīva. Šo šūnu līniju izmanto arī pētījumos par audzēja šūnu plastiskumu, neiroendokrīno diferenciāciju un augstas caurlaidspējas zāļu skrīningu. Tomēr, tāpat kā daudziem SCLC modeļiem, detalizētie mutāciju specifiskie profili var atšķirties starp datu kopām, un eksperimentiem, kuros nepieciešama precīza genomiskā informācija, ieteicams veikt papildu molekulāro raksturošanu.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu