NCI-H1048

A NCI-H1048 é uma linhagem celular de carcinoma pulmonar de pequenas células (SCLC) humano, derivada de um tumor pulmonar de um paciente adulto, e é amplamente utilizada como modelo de câncer de pulmão neuroendócrino. O carcinoma pulmonar de pequenas células é caracterizado por crescimento rápido, disseminação metastática precoce e forte associação com a diferenciação neuroendócrina, e a NCI-H1048 reflete muitas dessas características. As células geralmente crescem em suspensão ou como aglomerados fracamente aderentes e apresentam morfologia consistente com o SCLC, incluindo células pequenas e redondas com altas proporções núcleo/citoplasma.

No nível molecular, a NCI-H1048 exibe características típicas do SCLC, incluindo alterações em vias-chave de supressão tumoral, como TP53 e RB1, que são comumente inativadas nessa doença. A linhagem celular expressa marcadores neuroendócrinos, incluindo proteínas associadas à secreção hormonal e à diferenciação neuronal, tornando-a um modelo relevante para o estudo da sinalização neuroendócrina e da biologia tumoral. Assim como outros modelos de SCLC, ela também pode apresentar amplificação ou superexpressão de fatores oncogênicos envolvidos na proliferação e sobrevivência, contribuindo para seu fenótipo agressivo.

A NCI-H1048 é utilizada em pesquisas focadas na patogênese do câncer de pulmão de pequenas células, na sensibilidade a medicamentos e nos mecanismos de resistência. É particularmente valiosa para a avaliação de agentes quimioterápicos e terapias direcionadas no contexto de uma doença conhecida pela resposta inicial ao tratamento, seguida de rápida recidiva. A linhagem celular também é utilizada em estudos sobre plasticidade de células tumorais, diferenciação neuroendócrina e triagem de medicamentos em alta produtividade. No entanto, assim como em muitos modelos de SCLC, os perfis detalhados específicos de mutações podem variar entre conjuntos de dados, e recomenda-se uma caracterização molecular adicional para experimentos que exijam informações genômicas precisas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.