Prejsť na obsah
NCI-H1048
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
H1048, H-1048, NCIH1048

Dokumenty

NCI-H1048

Cell line · Číslo výrobku 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

NCI-H1048 je bunková línia malobunkového karcinómu pľúc (SCLC) pochádzajúca z pľúcneho nádoru dospelého pacienta, ktorá sa široko využíva ako model neuroendokrinného karcinómu pľúc. Malobunkový karcinóm pľúc sa vyznačuje rýchlym rastom, skorým metastázovaním a silnou asociáciou s neuroendokrinnou diferenciáciou, a NCI-H1048 odráža mnohé z týchto charakteristík. Bunky typicky rastú v suspenzii alebo ako voľne priliehajúce zhluky a vykazujú morfológiu zodpovedajúcu SCLC, vrátane malých, okrúhlych buniek s vysokým pomerom jadra k cytoplazme.

Na molekulárnej úrovni vykazuje NCI-H1048 charakteristické črty SCLC, vrátane zmien v kľúčových dráhach tumorových supresorov, ako sú TP53 a RB1, ktoré sú pri tomto ochorení bežne inaktivované. Táto bunková línia exprimuje neuroendokrinné markery, vrátane proteínov spojených s sekréciou hormónov a neuronálnou diferenciáciou, čo z nej robí relevantný model na štúdium neuroendokrinného signálovania a biológie nádorov. Podobne ako iné modely SCLC môže vykazovať aj amplifikáciu alebo nadmernú expresiu onkogénnych faktorov zapojených do proliferácie a prežitia, čo prispieva k jej agresívnemu fenotypu.

NCI-H1048 sa používa vo výskume zameranom na patogenézu malobunkového karcinómu pľúc, citlivosť na lieky a mechanizmy rezistencie. Je obzvlášť cenná pre hodnotenie chemoterapeutických látok a cielených terapií v kontexte ochorenia známeho počiatočnou odpoveďou na liečbu, po ktorej nasleduje rýchla recidíva. Táto bunková línia sa tiež používa v štúdiách plasticity nádorových buniek, neuroendokrínnej diferenciácie a vysokokapacitného skríningu liekov. Avšak, podobne ako pri mnohých modeloch SCLC, podrobné profily špecifické pre mutácie sa môžu líšiť medzi jednotlivými dátovými súbormi a pre experimenty vyžadujúce presné genomické informácie sa odporúča dodatočná molekulárna charakterizácia.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Stav MSI
Nestabilný (MSI vysoký)

04Identifikátory

Citácia
NCI-H1048 (katalógové číslo Cytion 305595)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 5 % FBS, 0,005 mg/ml inzulínu, 0,01 mg/ml transferínu, 30 nM seleničitanu sodného, 10 nM hydrokortizónu, 10 nM beta-estradiolu
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne zakryte prípravkom TrypLE Express, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
53 rokov
Etnická príslušnosť
Afroameričan