Siirry sisältöön
NCI-H1048
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
H1048, H-1048, NCIH1048

Asiakirjat

NCI-H1048

Cell line · Tuotenumero 305595

NCI-H1048 is a human small cell lung carcinoma (SCLC) cell line derived from a lung tumor in an adult patient and is widely used as a model of neuroendocr...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H1048 on ihmisen pienisoluista keuhkosyöpää (SCLC) edustava solulinja, joka on peräisin aikuispotilaan keuhkokasvaimesta, ja sitä käytetään laajalti neuroendokriinisen keuhkosyövän mallina. Pienisoluinen keuhkosyöpä on ominaista nopealla kasvulla, varhaisella etäpesäkkeiden leviämisellä ja vahvalla yhteydellä neuroendokriiniseen erilaistumiseen, ja NCI-H1048 heijastaa monia näistä piirteistä. Solut kasvavat tyypillisesti suspensiossa tai löyhästi kiinnittyneinä klustereina ja niiden morfologia vastaa SCLC:tä, mukaan lukien pienet, pyöreät solut, joilla on suuri ydin-sytoplasma-suhde.

Molekyylitasolla NCI-H1048:lla on SCLC:lle tyypillisiä piirteitä, kuten muutoksia keskeisissä tuumorisuppressorireiteissä, kuten TP53 ja RB1, jotka ovat yleisesti inaktivoituneet tässä taudissa. Solulinja ilmentää neuroendokriinisiä markkereita, mukaan lukien hormonien eritykseen ja hermosolujen erilaistumiseen liittyviä proteiineja, mikä tekee siitä merkittävän mallin neuroendokriinisen signalointijärjestelmän ja kasvaimen biologian tutkimiseen. Muiden SCLC-mallien tavoin se voi myös ilmentää proliferaatioon ja selviytymiseen liittyvien onkogeenisten tekijöiden amplifikaatiota tai yli-ilmentymistä, mikä osaltaan vaikuttaa sen aggressiiviseen fenotyyppiin.

NCI-H1048:aa käytetään tutkimuksessa, joka keskittyy pienisoluiseen keuhkosyöpään, lääkeherkkyyteen ja resistenssimekanismeihin. Se on erityisen arvokas kemoterapeuttisten aineiden ja kohdennettujen hoitojen arvioinnissa sairaudessa, joka tunnetaan alkuperäisestä hoitovasteesta, jota seuraa nopea uusiutuminen. Solulinjaa käytetään myös kasvainsolujen plastisuuden, neuroendokriinisen erilaistumisen ja suurikapasiteettisen lääkeaineiden seulonnan tutkimuksissa. Kuten monien SCLC-mallien kohdalla, yksityiskohtaiset mutaatiokohtaiset profiilit voivat kuitenkin vaihdella eri tietokantojen välillä, ja tarkkaa genomitietoa vaativissa kokeissa suositellaan lisämolekyylistä karakterisointia.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • H1048
  • H-1048
  • NCIH1048

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
MSI-tila
Epävakaa (MSI korkea)

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H1048 (Cytionin luettelonumero 305595)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1453

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 5 % FBS:llä, 0,005 mg/ml insuliinilla, 0,01 mg/ml transferriinilla, 30nM natriumseleniitillä, 10 nM hydrokortisonilla, 10 nM beeta-estradioolilla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan TrypLE Express -valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen sekoita solut varovasti 10 ml:lla elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Medium

    HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

    • 0.005 mg/ml Insulin
    • 0.01 mg/ml Transferrin
    • 30 nM Sodium selenite (final conc.)
    • 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
    • 10 nM beta-estradiol (final conc.)
    • extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
    • 5% fetal bovine serum (final conc.)
  7. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  8. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  9. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
53 vuotta
Etnisyys
Afroamerikkalainen