NCI-H1048

La NCI-H1048 es una línea celular de carcinoma pulmonar de células pequeñas (SCLC) humano derivada de un tumor pulmonar de un paciente adulto y se utiliza ampliamente como modelo de cáncer de pulmón neuroendocrino. El carcinoma pulmonar de células pequeñas se caracteriza por un crecimiento rápido, una diseminación metastásica temprana y una fuerte asociación con la diferenciación neuroendocrina, y la NCI-H1048 refleja muchas de estas características. Las células suelen crecer en suspensión o en grupos poco adherentes y presentan una morfología compatible con el SCLC, incluyendo células pequeñas y redondas con una elevada relación núcleo-citoplasma.

A nivel molecular, la NCI-H1048 presenta características propias del SCLC, entre ellas alteraciones en vías supresoras tumorales clave como TP53 y RB1, que suelen estar inactivadas en esta enfermedad. La línea celular expresa marcadores neuroendocrinos, incluidas proteínas asociadas a la secreción hormonal y la diferenciación neuronal, lo que la convierte en un modelo relevante para estudiar la señalización neuroendocrina y la biología tumoral. Al igual que otros modelos de SCLC, también puede presentar amplificación o sobreexpresión de factores oncogénicos implicados en la proliferación y la supervivencia, lo que contribuye a su fenotipo agresivo.

La NCI-H1048 se utiliza en investigaciones centradas en la patogénesis del cáncer de pulmón de células pequeñas, la sensibilidad a los fármacos y los mecanismos de resistencia. Resulta especialmente valiosa para evaluar agentes quimioterapéuticos y terapias dirigidas en un contexto de enfermedad conocido por su respuesta inicial al tratamiento seguida de una rápida recaída. La línea celular también se utiliza en estudios sobre la plasticidad de las células tumorales, la diferenciación neuroendocrina y el cribado de fármacos de alto rendimiento. Sin embargo, al igual que ocurre con muchos modelos de SCLC, los perfiles detallados específicos de mutaciones pueden variar entre los distintos conjuntos de datos, por lo que se recomienda una caracterización molecular adicional para los experimentos que requieran información genómica precisa.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía