NCI-H1048

NCI-H1048 to ludzka linia komórkowa drobnokomórkowego raka płuca (SCLC) pochodząca z guza płuca dorosłego pacjenta, szeroko stosowana jako model neuroendokrynnego raka płuca. Rak drobnokomórkowy płuca charakteryzuje się szybkim wzrostem, wczesnym rozprzestrzenianiem się przerzutów oraz silnym powiązaniem z różnicowaniem neuroendokrynnym, a linia NCI-H1048 odzwierciedla wiele z tych cech. Komórki zazwyczaj rosną w zawiesinie lub w postaci luźno przylegających skupisk i wykazują morfologię zgodną z SCLC, w tym małe, okrągłe komórki o wysokim stosunku jądra do cytoplazmy.

Na poziomie molekularnym NCI-H1048 wykazuje cechy charakterystyczne dla SCLC, w tym zmiany w kluczowych szlakach supresorów nowotworowych, takich jak TP53 i RB1, które są często inaktywowane w tej chorobie. Linia komórkowa wykazuje ekspresję markerów neuroendokrynnych, w tym białek związanych z wydzielaniem hormonów i różnicowaniem neuronów, co czyni ją odpowiednim modelem do badania sygnalizacji neuroendokrynnej i biologii nowotworów. Podobnie jak inne modele SCLC, może ona również wykazywać amplifikację lub nadekspresję czynników onkogennych zaangażowanych w proliferację i przeżycie, co przyczynia się do jej agresywnego fenotypu.

NCI-H1048 jest wykorzystywana w badaniach skupiających się na patogenezie drobnokomórkowego raka płuca, wrażliwości na leki oraz mechanizmach oporności. Jest ona szczególnie cenna w ocenie środków chemioterapeutycznych i terapii celowanych w kontekście choroby znanej z początkowej wrażliwości na leczenie, po której następuje szybki nawrót. Linia komórkowa jest również wykorzystywana w badaniach plastyczności komórek nowotworowych, różnicowania neuroendokrynnego oraz wysokoprzepustowego przesiewania leków. Jednak, podobnie jak w przypadku wielu modeli SCLC, szczegółowe profile specyficzne dla mutacji mogą się różnić w poszczególnych zestawach danych, dlatego w przypadku eksperymentów wymagających precyzyjnych informacji genomowych zaleca się dodatkową charakterystykę molekularną.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

Medium

HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum: The base medium for this cell line is DMEM:F12 Medium (Catalog No. 820400a). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium:

• 0.005 mg/ml Insulin
• 0.01 mg/ml Transferrin
• 30 nM Sodium selenite (final conc.)
• 10 nM Hydrocortisone (final conc.)
• 10 nM beta-estradiol (final conc.)
• extra 2 mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM)
• 5% fetal bovine serum (final conc.)

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym