NCI-H820

La lignée cellulaire NCI-H820 est une lignée cellulaire humaine de cancer du poumon à cellules non petites (CPNCP) dérivée d’un adénocarcinome pulmonaire chez un patient adulte. Elle fait partie du panel de lignées cellulaires du cancer du poumon du NCI et a été largement utilisée dans la recherche sur les thérapies ciblées en raison de ses caractéristiques génétiques uniques. Sur le plan morphologique, les cellules présentent des caractéristiques épithéliales et se développent sous forme de monocouches adhérentes. Elles sont généralement cultivées dans un milieu RPMI-1640 enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin et maintenues dans des conditions standard de culture cellulaire (37 °C, 5 % de CO₂).

Sur le plan génétique, la lignée NCI-H820 se distingue par la présence d’une mutation par délétion de l’exon 19 de l’EGFR (E746-A750del), une mutation activatrice courante associée à une sensibilité aux inhibiteurs de la tyrosine kinase de l’EGFR (ITK). Cependant, elle présente également une mutation secondaire T790M de l’EGFR, qui constitue un mécanisme bien établi de résistance acquise aux ITK de première génération, tels que l’erlotinib et le géfitinib. Ce statut de double mutation fait de la lignée NCI-H820 un modèle hautement pertinent pour l’étude des mécanismes de résistance et pour l’évaluation des inhibiteurs de l’EGFR de troisième génération comme l’osimertinib, qui peuvent surmonter la résistance médiée par la mutation T790M.

En plus de ses mutations de l’EGFR, la lignée NCI-H820 a été utilisée pour étudier les boucles de signalisation autocrines et les voies des récepteurs des facteurs de croissance. Des recherches ont démontré qu’elle exprime le récepteur du facteur de croissance analogue à l’insuline de type I (IGF-1R), contribuant ainsi aux signaux de survie et de prolifération. Son profil de double mutation et l’expression de récepteurs tyrosine-kinases en font un outil précieux dans les études précliniques axées sur la résistance aux médicaments, les stratégies de thérapie combinée et le développement d’approches thérapeutiques personnalisées pour le CPNPC présentant une mutation de l’EGFR.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.