NCI-H820

NCI-H820 je celična linija človeškega nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC), pridobljena iz pljučnega adenokarcinoma odraslega bolnika. Je del skupine za pljučnega raka NCI in se zaradi svojih edinstvenih genetskih značilnosti pogosto uporablja pri raziskavah ciljanih terapij. Morfološko imajo celice epitelijske značilnosti in rastejo kot zlepljene monoslojne celice. Običajno se gojijo v gojišču RPMI-1640, dopolnjenem z 10 % fetalnega govejega seruma, in vzdržujejo v standardnih pogojih celične kulture (37 °C, 5 % CO₂).

Genetsko je NCI-H820 značilen po tem, da ima delecijsko mutacijo eksona 19 EGFR (E746-A750del), ki je pogosta aktivacijska mutacija, povezana z občutljivostjo na inhibitorje tirozin kinaze EGFR (TKI). Vendar ima tudi sekundarno mutacijo EGFR T790M, ki je uveljavljen mehanizem pridobljene odpornosti na TKI prve generacije, kot sta erlotinib in gefitinib. Zaradi te dvojne mutacije je NCI-H820 zelo primeren model za raziskovanje mehanizmov odpornosti in za ocenjevanje zaviralcev EGFR tretje generacije, kot je osimertinib, ki lahko premagajo odpornost, posredovano s T790M.

Poleg mutacij EGFR je bil model NCI-H820 uporabljen za preučevanje avtokrinih signalnih zank in receptorskih poti rastnih dejavnikov. Raziskave so pokazale, da izraža receptor za inzulinu podoben rastni dejavnik tipa I (IGF-1R), ki prispeva k signalizaciji preživetja in proliferacije. Zaradi dvojnega mutacijskega profila in izražanja receptorskih tirozin kinaz je dragoceno orodje v predkliničnih študijah, osredotočenih na odpornost na zdravila, strategije kombiniranega zdravljenja in razvoj personaliziranih pristopov zdravljenja NSCLC z mutantnim EGFR.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo